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Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent <em>In Situ</em> Hybridization (FISH)

Adhesion of Plasmodium falciparum infected erythrocytes (IE) to human endothelial receptors during malaria infections is mediated by expression of PfEMP1 ...

University of Copenhagen

Copenhagen University Hospital (Rigshospitalet)

Hemophilus-influenzae no tipificable (NTHi) es un importante pat&oacute;geno respiratorio de humanos espec&iacute;ficos colonizar la mucosa del tracto respiratorio superior. La bacteria es una causa com&uacute;n de otitis media aguda en los ni&ntilde;os y las exacerbaciones en pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva cr&oacute;nica (EPOC). Encontraron a una prote&iacute;na del mieloma D-lambda de la inmunoglobulina (Ig) para detectar una prote&iacute;na superficial de 16 kDa que designamos prote&iacute;na E (PE). El gen del pe fue clonado utilizando una biblioteca de ADN gen&oacute;mica de NTHi, y una prote&iacute;na truncada derivado del PE que carece el p&eacute;ptido se&ntilde;al end&oacute;gena (PE22-160) fue sintetizada y producida en grandes cantidades en Escherichia coli. Curiosamente, PE se expres&oacute; en la superficie bacteriana de NTHi seg&uacute;n lo revelado por citometr&iacute;a de flujo con la prote&iacute;na del mieloma IgD-lambda o anticuerpos policlonales espec&iacute;ficos para PE. Un mutante de NTHi PE-deficiente fue producido y hab&iacute;a perdido el 50% de su capacidad adhesiva en comparaci&oacute;n con las contrapartes de tipo salvaje cuando se analizaron para la adhesi&oacute;n a las c&eacute;lulas epiteliales alveolares pulmonares II tipo. En paralelo, e. coli expresando integral PE1-160 se adhirieron significativamente m&aacute;s eficientemente a epiteliales c&eacute;lulas en comparaci&oacute;n con el tipo salvaje e. coli. IgD recombinante que reconoce el producto qu&iacute;mico cloruro de dansilo no interactuar con PE indicando que la prote&iacute;na del mieloma IgD-lambda probablemente era un anticuerpo dirigido contra el epitopo superficial de H. influenzae. En conclusi&oacute;n, hemos descubierto una nueva prote&iacute;na de membrana externa de NTHi con propiedades adhesivas usando una prote&iacute;na de IgD-mieloma.

Identificaci&oacute;n de una novela Haemophilus influenzae prote&iacute;na importante para la adherencia a las c&eacute;lulas epiteliales.

&#x53EF;&#x952E;&#x5165;&#x975E;&#x662F;&#x4E0A;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#x7684;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC; &#xFF08;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#xFF09; &#x662F;&#x4E0A;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x7C98;&#x819C;&#x91CD;&#x8981;&#x4EBA;&#x6743;&#x5177;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#x81F4;&#x75C5;&#x83CC;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7EC6;&#x83CC;&#x662F;&#x5C0F;&#x513F;&#x6025;&#x6027; otitis media &#x548C;&#x52A0;&#x91CD;&#x671F;&#x6162;&#x6027;&#x963B;&#x585E;&#x6027;&#x80BA;&#x75C5; (COPD) &#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x5E38;&#x89C1;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; (Ig) D lambda &#x53D1;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6211;&#x4EEC;&#x6307;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D; E (PE) 16 kDa &#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;Pe &#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x514B;&#x9686;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; DNA &#x6587;&#x5E93;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x80BD; (PE22-160&#xFF09; &#x622A;&#x65AD;&#x7684; PE &#x6E90;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x5408;&#x6210;&#x53CA;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x5927;&#x91CF;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x5C06; PE &#x5728;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x6240;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x4F7F;&#x7528; IgD lambda &#x53D1;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x86CB;&#x767D;&#x6216; PE &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x591A;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x4F53;&#x80B2;&#x7F3A;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x4EA7;&#x751F;&#x548C;&#x5931;&#x53BB;&#x5176;&#x80F6;&#x7C98;&#x5242;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BF9;&#x5E94;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E8C;&#x80BA;&#x80BA;&#x6CE1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x65F6;&#x7684; 50%&#x3002;&#x540C;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x8868;&#x8FBE;&#x5168;&#x957F; PE1 160 &#x9075;&#x5B88;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x66F4;&#x591A;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x4E39;&#x78FA;&#x9170;&#x6C2F;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; IgD &#x4E0D;&#x505A; PE &#x6307;&#x793A; IgD lambda &#x53D1;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x86CB;&#x767D;&#x6700;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x9488;&#x5BF9; H.&#x6746;&#x83CC;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x6297;&#x4F53;&#x4E0E;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528; IgD &#x53D1;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7C98;&#x63A5;&#x6027;&#x80FD;&#x3002;

&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

Non-typable Haemophilus influenzae (NTHi) is an important human-specific respiratory pathogen colonizing the mucosa of the upper respiratory tract. The bacterium is a common cause of acute otitis media in children and exacerbations in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD). An immunoglobulin (Ig) D-lambda myeloma protein was found to detect a 16 kDa surface protein that we designated protein E (PE). The pe gene was cloned using an NTHi genomic DNA library, and a truncated PE-derived protein lacking the endogenous signal peptide (PE22-160) was synthesized and produced in large amounts in Escherichia coli. Interestingly, PE was expressed at the bacterial surface of NTHi as revealed by flow cytometry using the IgD-lambda myeloma protein or PE-specific polyclonal antibodies. A PE-deficient NTHi mutant was produced and lost 50% of its adhesive capacity as compared to the wild-type counterpart when analysed for adhesion to type II lung alveolar epithelial cells. In parallel, E. coli expressing full-length PE1-160 adhered significantly more efficiently to epithelial cells as compared to wild-type E. coli. Recombinant IgD that recognized the chemical dansyl-chloride did not interact with PE indicating that the IgD-lambda myeloma protein most likely was an antibody directed against the H. influenzae surface epitope. In conclusion, we have discovered a novel NTHi outer membrane protein with adhesive properties using an IgD-myeloma protein.

Identification of a novel Haemophilus influenzae protein important for adhesion to epithelial cells.

Non-typable Haemophilus influenzae (polysaccharides) est un important pathog&egrave;ne respiratoire de sp&eacute;cifiques &agrave; l&#39;humain qui colonisent la muqueuse des voies respiratoires sup&eacute;rieures. La bact&eacute;rie est une cause fr&eacute;quente d&#39;otitis media aigu&euml; chez les enfants et les exacerbations chez les patients atteints de la maladie pulmonaire obstructive chronique (MPOC). Une prot&eacute;ine de my&eacute;lome D-lambda immunoglobuline (Ig) a &eacute;t&eacute; trouv&eacute;e pour d&eacute;tecter une prot&eacute;ine de surface 16 kDa que nous avons d&eacute;sign&eacute; prot&eacute;ine E (PE). Le g&egrave;ne du pe a &eacute;t&eacute; clon&eacute; &agrave; l&#39;aide d&#39;une banque d&#39;ADN g&eacute;nomique de polysaccharides, et une prot&eacute;ine tronqu&eacute;e de PE-d&eacute;riv&eacute; d&eacute;pourvu du peptide signal endog&egrave;ne (PE22-160) a &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute;e et produite de grandes quantit&eacute;s chez Escherichia coli. Fait int&eacute;ressant, PE a &eacute;t&eacute; exprim&eacute;e &agrave; la surface bact&eacute;rienne des polysaccharides telle que r&eacute;v&eacute;l&eacute;e par cytom&eacute;trie de flux &agrave; l&#39;aide de la prot&eacute;ine du my&eacute;lome IgD-lambda ou anticorps polyclonaux PE sp&eacute;cifiques. Un mutant d&eacute;ficient en PE polysaccharides a &eacute;t&eacute; produit et a perdu 50 % de sa capacit&eacute; adh&eacute;sive par rapport &agrave; la contrepartie sauvage lorsque analys&eacute;s pour l&#39;adh&eacute;rence aux cellules &eacute;pith&eacute;liales alv&eacute;olaires de type II pulmonaire. En parall&egrave;le, e. coli exprimant la pleine longueur PE1-160 ont adh&eacute;r&eacute; significativement plus efficacement aux ent&eacute;rocytes par rapport au type sauvage e. coli. IgD recombinant qui reconna&icirc;t le chlorure de dansyle chimique n&#39;interagit pas avec le PE, ce qui indique que la prot&eacute;ine de my&eacute;lome IgD-lambda plus probable &eacute;tait un anticorps dirig&eacute; contre l&#39;&eacute;pitope surface de H. influenzae. En conclusion, nous avons d&eacute;couvert une nouvelle prot&eacute;ine de membrane externe de polysaccharides avec les propri&eacute;t&eacute;s adh&eacute;sives &agrave; l&#39;aide d&#39;une prot&eacute;ine du my&eacute;lome IgD.

Identification d&#39;une nouvelle Haemophilus influenzae de prot&eacute;ine importante pour l&#39;adh&eacute;rence aux cellules &eacute;pith&eacute;liales.

Non-typisierbaren Haemophilus Influenzae (NTHi) ist ein wichtiger Mensch-spezifische respiratorische Erreger kolonisieren die Schleimh&auml;ute der oberen Atemwege. Das Bakterium ist eine h&auml;ufige Ursache f&uuml;r akute Otitis media bei Kindern und Exazerbationen bei Patienten mit chronisch obstruktiver Lungenerkrankung (COPD). Ein Immunglobulin (Ig) D-Lambda-Myelom-Protein fand ein Oberfl&auml;che 16 kDa-Protein erkennen, dass wir Protein E (PE) benannt. Das Pe-gen geklont wurde, mit einer NTHi genomische DNA Bibliothek und eine abgeschnittene PE abgeleitete Protein fehlt das endogene Signal-Peptid (PE22-160) synthetisiert und in gro&szlig;en Mengen in Escherichia coli produziert wurde. Interessanterweise wurde PE auf der bakteriellen Oberfl&auml;che NTHi ausgedr&uuml;ckt, wie durch Durchflusszytometrie, die mithilfe des IgD-Lambda-Myelom-Protein oder PE-spezifische polyklonale Antik&ouml;rper aufgedeckt. PE-defizienten NTHi Mutanten wurde produziert und verloren 50 % seiner Klebstoff Kapazit&auml;t im Vergleich zu Wildtyp Gegenst&uuml;ck f&uuml;r die Verklebung auf Typ II Lunge alveolaren Epithelzellen analysiert. Parallel verklebt E. Coli Ausdr&uuml;cken in PE1-160 deutlich mehr effizient zu Epithelzellen im Vergleich zu Wildtyp E. Coli. Rekombinante IgD, die die chemischen Dansyl Chloride erkannt interagierte nicht mit PE darauf hinweist, dass das IgD-Lambda-Myelom-Protein am ehesten ein Antik&ouml;rper, der gegen die H. Influenzae Oberfl&auml;che Epitop gerichtet war. Abschlie&szlig;end haben wir ein neues NTHi &auml;u&szlig;ere Membran-Protein mit Klebeeigenschaften, die mithilfe einer IgD-Myelom-Protein entdeckt.

Kennung f&uuml;r ein neues Haemophilus Influenzae Protein wichtig f&uuml;r Haftung auf Epithelzellen.

Non tipizzabili Haemophilus influenzae (NTHi) &egrave; un importante agente patogeno delle vie respiratorie umane specifiche con colonizzare la mucosa del tratto respiratorio superiore. Il batterio &egrave; una comune causa di otitis media acuta nei bambini e le esacerbazioni in pazienti con malattia polmonare ostruttiva cronica (BPCO). Una proteina del mieloma di D-lambda immunoglobuline (Ig) &egrave; stata trovata per rilevare una proteina di superficie di 16 kDa che abbiamo designato proteina E (PE). Il pe il gene &egrave; stato clonato utilizzando una libreria di DNA genomica NTHi, e una proteina tronca PE-derivato, manca il peptide segnale endogeno (PE22-160) &egrave; stata sintetizzata e prodotto in grandi quantit&agrave; in Escherichia coli. &Egrave; interessante notare che, PE &egrave; stato espresso alla superficie batterica di NTHi come rivelato in citometria a flusso utilizzando la proteina mieloma IgD-lambda o anticorpi policlonali specifici PE. Un mutante NTHi PE-carente &egrave; stato prodotto e perso il 50% della sua capacit&agrave; adesiva rispetto la controparte del selvaggio-tipo quando analizzato per adesione alle cellule epiteliali alveolari del polmone di tipo II. In parallelo, e. coli che esprimono full-length PE1-160 aderito significativamente pi&ugrave; cellule epiteliali efficientemente a rispetto al wild-type e. coli. IgD ricombinante che riconobbe il chimico dansyl-cloruro non ha fatto interagire con PE che indica che la proteina del mieloma IgD-lambda pi&ugrave; probabile era un anticorpo diretto contro l&#39;h. influenzae superficie epitopo. In conclusione, abbiamo scoperto una proteina di membrana esterna NTHi romanzo con propriet&agrave; adesive utilizzando una proteina mieloma IgD.

Identificazione di una romanzo Haemophilus influenzae proteina importante per l&#39;adesione alle cellule epiteliali.

&#x975E;&#x5165;&#x529B;&#x53EF;&#x80FD;&#x30D8;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30B9; (NTHi&#xFF09; &#x4E0A;&#x6C17;&#x9053;&#x7C98;&#x819C;&#x3092;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4EBA;&#x9593;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x547C;&#x5438;&#x5668;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x83CC;&#x306F;&#x5C0F;&#x5150;&#x306E;&#x6025;&#x6027; otitis media &#x3068;&#x5897;&#x60AA;&#x6162;&#x6027;&#x9589;&#x585E;&#x6027;&#x80BA;&#x75BE;&#x60A3; (COPD) &#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; (Ig) D &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0;&#x306E;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x816B;&#x86CB;&#x767D;&#x306F;&#x6211;&#x3005; &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; E (PE) &#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B; 16 kDa &#x8868;&#x9762;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Pe &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x3001;NTHi genomic DNA &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8907;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; (PE22-160&#xFF09; &#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F; PE &#x6D3E;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5927;&#x91CF;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30E9;&#x30E0;&#x30C0; igd &#x578B;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x816B;&#x86CB;&#x767D;&#x307E;&#x305F;&#x306F; PE &#x56FA;&#x6709;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F; PE NTHi &#x7D30;&#x83CC;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PE &#x6B20;&#x4E4F; NTHi &#x5909;&#x7570;&#x751F;&#x6210;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x76F8;&#x624B;&#x306F; II &#x578B;&#x80BA;&#x306E;&#x80BA;&#x80DE;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x63A5;&#x7740;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306E; 50% &#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E26;&#x5217;&#x3067;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9; PE1 160 &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3082;&#x3063;&#x3068;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x4ED8;&#x7740;&#x3002;&#x5316;&#x5B66;&#x306E;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5869;&#x5316;&#x8A8D;&#x8B58;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; IgD PE IgD &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x816B;&#x86CB;&#x767D;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044; H. &#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;, &#x306F;&#x6211;&#x3005; igd &#x578B;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x816B;&#x86CB;&#x767D;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x63A5;&#x7740;&#x6027;&#x65B0;&#x898F; NTHi &#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x65AC;&#x65B0;&#x30D8;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30B9;&#x83CC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;

&#xBE44; &#xC784;&#xC758;&#xB85C; Haemophilus &#xD615; (NTHi) &#xBCD1;&#xC6D0;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xBD80; &#xD638;&#xD761;&#xAE30;&#xC758; &#xC810; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC815;&#xCC29; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774; &#xAE09;&#xC131; otitis media exacerbations &#xB9CC;&#xC131; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xC131; &#xD3D0; &#xC9C8;&#xD658; (COPD) &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC6D0;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; (Ig) D-&#xB78C;&#xB2E4; myeloma &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; E (PE) &#xC9C0;&#xC815; 16 kDa &#xD45C;&#xBA74; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xAC10;&#xC9C0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. Pe &#xC720;&#xC804;&#xC790; NTHi genomic DNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB294; &#xACE0; &#xC0DD; &#xC2E0;&#xD638; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; (PE22-160) &#xBD80;&#xC871; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; PE &#xD30C;&#xC0DD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xB7C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, PE cytometry IgD &#xB78C;&#xB2E4; myeloma &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB610;&#xB294; PE &#xAD00;&#xB828; polyclonal &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1D;&#xD600; NTHi &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. PE &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; NTHi &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xACFC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB300;&#xC751; &#xC720;&#xD615; II &#xD3D0; &#xD3D0; &#xD3EC; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC811;&#xCC29; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; 50%&#xB97C; &#xC783;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; PE1-160 &#xD45C;&#xD604; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC900;&#xC218;. &#xD654;&#xD559; dansyl &#xC5FC;&#xD654; &#xC778;&#xC2DD; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; IgD PE &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; IgD &#xB78C;&#xB2E4; myeloma &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD5E4; &#xD615; &#xD45C;&#xBA74; epitope&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC10;&#xB3C5; &#xD588;&#xC74C;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xB860;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC; IgD myeloma &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC811;&#xCC29; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC18C;&#xC124; NTHi &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC18C;&#xC124; Haemophilus &#xD615; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;.

&#x9ECF;&#x9644;&#x86CB;&#x767D; E (PE) &#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#x81F4;&#x75C5;&#x83CC;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC; &#xFF08;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#xFF09; &#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x6240;&#x6709;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x52A0;&#x5165;&#x5404;&#x79CD;&#x6765;&#x6E90;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00; PE &#x7F3A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5185;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x662F;&#x4E0E; PE &#x8868;&#x793A;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E86;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;PE &#x8868;&#x793A;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x6216;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x6297;&#x866B;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x91CD;&#x7EC4; PE22-160 &#x65E0;&#x8102;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5F15;&#x8D77;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x80F6;&#x7C98;&#x5242; PE &#x57DF;&#x88AB;&#x5B9A;&#x4E49;&#x5185; PE84-108&#xFF0C;preincubation &#x4E0E;&#x6B64;&#x591A;&#x80BD;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x963B;&#x585E;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x682A;&#x3002;PE84-108 &#x514D;&#x75AB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6E05;&#x9664;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x8FBE; 8-fold &#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x5BF9;&#x80BA;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x6BD4;&#x63A7;&#x5236;&#x80BD;&#x514D;&#x75AB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x53CD; PE &#x9F20;&#x6807;&#x4ECE;&#x75AB;&#x82D7;&#x63A5;&#x79CD;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6297;&#x4F53;&#x963B;&#x6B62;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x7C98;&#x9644;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x9ECF;&#x9644; PE &#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x611F;&#x67D3;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x4E0D;&#x53EF;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x9ECF;&#x9644;&#x86CB;&#x767D; e&#xFF1A; &#x8868;&#x5F81;&#x53CA;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

The adhesin protein E (PE) of the human respiratory pathogen nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi) exists in all clinical isolates. In the present study, NTHi adherence to epithelial cells of various origins was further analyzed. The number of intraepithelial PE-deficient NTHi was decreased compared with PE-expressing NTHi. Interestingly, PE-expressing NTHi or Escherichia coli transformants, in addition to soluble recombinant PE22-160 without a lipid moiety, induced a proinflammatory cell response. The adhesive PE domain was defined within PE84-108, and preincubation of epithelial cells with this peptide blocked adhesion of several clinical NTHi isolates. Mice immunized with PE84-108 cleared NTHi up to 8-fold more efficiently on pulmonary challenge than did mice immunized with a control peptide. Finally, anti-PE mouse antibodies from vaccinated mice prevented NTHi adhesion. Our data suggest that the ubiquitous adhesin PE plays an important role in the pathogenesis of NTHi infection.

Nontypeable Haemophilus influenzae adhesin protein E: characterization and biological activity.

La prot&eacute;ine de l&#39;adh&eacute;sine E (PE) de l&#39;agent pathog&egrave;ne respiratoire humain nontypeable Haemophilus influenzae (polysaccharides) existe dans tous les isolats cliniques. Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, polysaccharides adh&eacute;rence aux cellules &eacute;pith&eacute;liales de diverses origines &eacute;tait plus analys&eacute;. Le nombre d&#39;intra-&eacute;pith&eacute;liale PE d&eacute;ficients en polysaccharides a diminu&eacute; comparativement aux polysaccharides exprimant le PE. Fait int&eacute;ressant, polysaccharides exprimant le PE ou Escherichia coli transformants, outre PE22 recombinantes solubles-160 sans une portion de lipides, induit une r&eacute;ponse des cellules pro-inflammatoires. Le domaine de PE adh&eacute;sif a &eacute;t&eacute; d&eacute;fini au sein de la PE84-108 et pr&eacute;-incubation des cellules &eacute;pith&eacute;liales avec ce peptide bloqu&eacute; l&#39;adh&eacute;sion de plusieurs isolats cliniques de polysaccharides. Souris immunis&eacute;es avec PE84-108 effac&eacute; polysaccharides jusqu&#39;&agrave; 8 fois plus efficacement le d&eacute;fi pulmonaire que les souris immunis&eacute;es avec un peptide de contr&ocirc;le. Enfin, les anticorps de souris anti-PE des souris vaccin&eacute;es ont emp&ecirc;ch&eacute; polysaccharides adh&eacute;rence. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que l&#39;adh&eacute;sine omnipr&eacute;sent PE joue un r&ocirc;le important dans la pathogen&egrave;se de l&#39;infection de polysaccharides.

Nontypeable Haemophilus influenzae adh&eacute;sine prot&eacute;ique e: caract&eacute;risation et activit&eacute; biologique.

Das Adhesin Protein E (PE) von der menschlichen Atemwege Pathogen Nontypeable Haemophilus Influenzae (NTHi) ist in allen klinischen Isolaten vorhanden. In der vorliegenden Studie wurde NTHi Einhaltung der Epithelzellen unterschiedlicher Herkunft weiter analysiert. Die Zahl der intraepitheliale PE-defizienten NTHi war im Vergleich zu PE-Ausdr&uuml;cken NTHi abgenommen. Interessanterweise induzierte NTHi PE-Ausdr&uuml;cken oder Escherichia coli-Transformationen, neben l&ouml;slichen rekombinante PE22-160 ohne ein Lipid-Gruppe, eine Proinflammatory Zelle Antwort. Die selbstklebende PE-Dom&auml;ne wurde innerhalb PE84-108 definiert und Preincubation von Epithelzellen mit dieses Peptid blockiert Adh&auml;sion von mehreren klinischen NTHi-Isolaten. M&auml;use mit PE84-108 geimpft deaktiviert NTHi bis zu 8-fach effizienter auf pulmonale Herausforderung als M&auml;use, die mit einem Steuerelement Peptid geimpft hat. Schlie&szlig;lich verhindert Anti-PE-Maus-Antik&ouml;rper von M&auml;use NTHi Adh&auml;sion. Unsere Daten zeigen, dass die allgegenw&auml;rtigen Adhesin PE eine wichtige Rolle in der Pathogenese von NTHi-Infektion spielt.

Nontypeable Haemophilus Influenzae Adhesin Protein E: Charakterisierung und biologische Aktivit&auml;t.

La proteina adhesin E (PE) di agente patogeno respiratorio umano nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi) esiste in tutti gli isolati clinici. Nel presente studio, NTHi aderenza alle cellule epiteliali di varie origini &egrave; stato ulteriormente analizzato. Il numero di intraepiteliale NTHi PE-carenti era diminuito rispetto al PE-esprimere NTHi. &Egrave; interessante notare che, esprimendo PE NTHi o Escherichia coli transformants, oltre a solubile ricombinante PE22-160 senza una frazione lipidica, indotta da una risposta cellulare proinfiammatorie. Il dominio PE adesivo &egrave; stato definito all&#39;interno di PE84-108 e preincubazione delle cellule epiteliali con questo peptide bloccato adesione di diversi isolati clinici di NTHi. Topi immunizzati con PE84-108 cancellata fino a ad pi&ugrave; efficientemente NTHi polmonare sfida di fatto topi immunizzati con un peptide di controllo. Infine, gli anticorpi anti-PE mouse da topi vaccinati impedito NTHi adesione. I nostri dati suggeriscono che l&#39;onnipresente adhesin PE svolge un ruolo importante nella patogenesi dell&#39;infezione NTHi.

Nontypeable Haemophilus influenzae adhesin proteina e: caratterizzazione e biologico attivit&agrave;.

&#x30A2;&#x30C9;&#x30D8;&#x30B7;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; E (PE) &#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x547C;&#x5438;&#x5668;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x4E2D;&#x8033;&#x306E;&#x30D8;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30B9; (NTHi) &#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B; NTHi &#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x8D77;&#x6E90;&#x3092;&#x89E3;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5185; PE &#x6B20;&#x4E4F; NTHi &#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x3001;PE &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; NTHi &#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;PE &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; NTHi &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC; transformants &#x306A;&#x3057;&#x8102;&#x8CEA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; PE22 160 &#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x63A5;&#x7740;&#x306E; PE &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; PE84 108 &#x5185;&#x3067;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x4F4E;&#x3053;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x81E8;&#x5E8A; NTHi &#x5206;&#x96E2;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PE84-108 &#x3067;&#x514D;&#x75AB;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5236;&#x5FA1;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3067;&#x514D;&#x75AB;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304C;&#x3088;&#x308A; NTHi &#x3088;&#x308A;&#x6700;&#x5927; 8 &#x500D;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x80BA;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3092;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6297; PE &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x6297;&#x4F53;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x63A5;&#x7A2E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; NTHi &#x4ED8;&#x7740;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9; &#x30A2;&#x30C9;&#x30D8;&#x30B7;&#x30F3; PE NTHi &#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E2D;&#x8033;&#x30D8;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30B9;&#x83CC;&#x30A2;&#x30C9;&#x30D8;&#x30B7;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; e: &#x6027;&#x72B6;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3002;

Adhesin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; E (PE) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; nontypeable Haemophilus &#xD615; (NTHi)&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAE30;&#xC6D0;&#xC758; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD558; NTHi &#xC900;&#xC218; &#xB354;&#xC6B1;&#xB354; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. Intraepithelial PE &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; NTHi &#xC218;&#xAC00; NTHi PE &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC9C0;&#xC9C8; moiety &#xC5C6;&#xC774; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; PE22 160 &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; PE &#xD45C;&#xD604; NTHi &#xB610;&#xB294; Escherichia&#xC758; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; transformants proinflammatory &#xC140; &#xBC18;&#xC751; &#xC720;&#xB3C4;. &#xC811;&#xCC29; PE &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; PE84-108 &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xBC0F;&#xC774; &#xD3A9; &#xD2F0;&#xC774; &#xB4DC;&#xC640; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; preincubation &#xCC28;&#xB2E8; &#xB41C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC784;&#xC0C1; NTHi &#xACA9;&#xB9AC;&#xC758; &#xC811;&#xCC29;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; PE84-108 &#xC811;&#xC885; &#xD5C8;&#xAC00; NTHi &#xCD5C;&#xB300; 8-fold &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3D0;&#xB3C4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xC811;&#xC885; &#xD55C; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xB41C; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xD2F0;-PE &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD56D; &#xCCB4; NTHi &#xC811;&#xCC29; &#xBC29;&#xC9C0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; adhesin PE NTHi &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nontypeable Haemophilus &#xD615; adhesin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; e: &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9;.

La prote&iacute;na adhesina E (PE) de los pat&oacute;geno respiratorio humano no tipificable Haemophilus influenzae (NTHi) existe en todos los aislados cl&iacute;nicos. En el presente estudio, se analiz&oacute; m&aacute;s NTHi adherencia a las c&eacute;lulas epiteliales de diversos or&iacute;genes. El n&uacute;mero de intraepitelial NTHi PE-deficiente ha disminuido en comparaci&oacute;n con NTHi PE-expresi&oacute;n. Curiosamente, NTHi PE-expresi&oacute;n o Escherichia coli transformantes, adem&aacute;s soluble recombinante PE22-160 sin un grupo de l&iacute;pidos, indujeron una respuesta de la c&eacute;lula de proinflamatorias. El dominio PE adhesivo fue definido en PE84-108, y preincubaci&oacute;n de c&eacute;lulas epiteliales con este p&eacute;ptido bloquea la adhesi&oacute;n de varios aislamientos cl&iacute;nicos de NTHi. Ratones inmunizados con PE84-108 despejaron NTHi hasta 8 m&aacute;s eficientemente en desaf&iacute;o pulmonar que hicieron los ratones inmunizados con un p&eacute;ptido de control. Finalmente, los anticuerpos anti-PE rat&oacute;n de ratones vacunados impidieron NTHi adherencia. Nuestros datos sugieren que la adhesina omnipresente PE desempe&ntilde;a un papel importante en la patogenia de la infecci&oacute;n NTHi.

Nontypeable Haemophilus influenzae adhesina prote&iacute;na E: caracterizaci&oacute;n y actividad biol&oacute;gica.

&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x5468;&#x671F;&#x548C;&#x5185;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE; (IE) &#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x662F;&#x77E5;&#x4E4B;&#x751A;&#x5C11;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x53D1;&#x5C55;&#x65B9;&#x9762;&#x5F71;&#x54CD;&#x759F;&#x75BE;&#x53D1;&#x75C5;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x6765;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x65F6;&#x95F4;&#x65E2;&#x591A;&#x5DEE;&#x8DDD; (G)&#xFF0C;DNA &#x5408;&#x6210; (S) &#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB; (M) &#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x662F;&#x5B9A;&#x4E49;&#x660E;&#x786E;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x53F8;&#x662F;&#x5426;&#x7ACB;&#x5373;&#x8DDF;&#x7740;&#x5288;&#x6838;&#x4FE1;&#x5C01;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5973;&#x513F;&#x88C2;&#x6B96;&#x5B50;&#x53F7;&#x7801;&#x4E0D;&#x9075;&#x5FAA;&#x9884;&#x671F;&#x4ECE;&#x4E8C;&#x8FDB;&#x5236;&#x7684;&#x5206;&#x90E8;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x6570;&#x76F8;&#x7B49;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x96BE;&#x4EE5;&#x89E3;&#x91CA;&#x4F7F;&#x7528;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x6807;&#x51C6;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x51E0;&#x4F55;&#x6269;&#x5F20;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x540C;&#x6B65;&#x6280;&#x672F;&#x3001; &#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6765;&#x60F3;&#x8C61;&#x4E3B;&#x8981;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F; (FISH) &#x9075;&#x5FAA;&#x7684;&#x79FB;&#x52A8;&#x548C;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x623F;&#x5C4B;&#x7684;&#x65F6;&#x673A;&#x548C;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7B49;&#x6548;&#x9879;&#xFF0C;centriolar &#x7684;&#x6591;&#x5757;&#xFF0C;&#x5F02;&#x6B65;&#x91CD;&#x53E0;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F8;&#x5173;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0E;&#x6838;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x759F;&#x539F;&#x866B; schizogony &#x7684;&#x65B0;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x6539;&#x5584;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x548C;&#x5176;&#x5728;&#x759F;&#x539F;&#x866B; IE &#x5F00;&#x53D1;&#x3001; &#x5C55;&#x793A;&#x5F02;&#x6B65;&#x7684;&#x3001; &#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x6838;&#x53F8; schizogony&#xFF0C;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x8C03;&#x8282;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7EA7;&#x6570;&#x7684; centriolar &#x6591;&#x5757;&#x4E0E;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5206;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x51B3;&#x8BAE;&#x3002;

&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x5185;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE; cell cycle &#x548C;&#x5F02;&#x6B65;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x53F8;&#x671F;&#x95F4; schizogony centriolar &#x6591;&#x5757;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

The cell division cycle and mitosis of intra-erythrocytic (IE) Plasmodium falciparum are poorly understood aspects of parasite development which affect malaria molecular pathogenesis. Specifically, the timing of the multiple gap (G), DNA synthesis (S) and chromosome separation (M) phases of parasite mitosis are not well defined, nor whether genome divisions are immediately followed by cleavage of the nuclear envelope. Curiously, daughter merozoite numbers do not follow the geometric expansion expected from equal numbers of binary divisions, an outcome difficult to explain using the standard model of cell cycle regulation. Using controlled synchronisation techniques, confocal microscopy to visualise key organelles and fluorescence in situ hybridization (FISH) to follow the movements and replication of genes and telomeres, we have re-analysed the timing and progression of mitotic events. The asynchronous duplications of the P. falciparum centrosome equivalents, the centriolar plaques, are established and these are correlated with chromosome and nuclear divisions in a new model of P. falciparum schizogony. Our results improve the resolution of the cell cycle and its phases during P. falciparum IE development, showing that asynchronous, independent nuclear division occurs during schizogony, with the centriolar plaques playing a major role in regulating mitotic progression.

The progression of the intra-erythrocytic cell cycle of Plasmodium falciparum and the role of the centriolar plaques in asynchronous mitotic division during schizogony.

Le cycle de division cellulaire et la mitose d&#39;intra &eacute;rythrocytaire (IE) Plasmodium falciparum sont mal compris les aspects du d&eacute;veloppement du parasite qui affectent la pathogen&egrave;se mol&eacute;culaire de paludisme. Plus particuli&egrave;rement, la synchronisation de l&#39;&eacute;cart de multiples (G), synth&egrave;se de l&#39;ADN (S) et des phases de s&eacute;paration (M) du chromosome de la mitose parasite ne sont pas bien d&eacute;finis, ni si les divisions du g&eacute;nome sont imm&eacute;diatement suivis de clivage de l&#39;enveloppe nucl&eacute;aire. Curieusement, la fille m&eacute;rozo&iuml;te num&eacute;ros ne suivent pas l&#39;expansion g&eacute;om&eacute;trique attendue d&#39;un nombre &eacute;gal de divisions binaires, un r&eacute;sultat difficile &agrave; expliquer &agrave; l&#39;aide du mod&egrave;le standard de la r&eacute;gulation du cycle cellulaire. &Agrave; l&#39;aide de techniques de synchronisation contr&ocirc;l&eacute;, microscopie confocale, de visualiser les principaux organites et hybridation in situ fluorescence (FISH) de suivre les mouvements et la r&eacute;plication des g&egrave;nes et des t&eacute;lom&egrave;res, nous avons &eacute;t&eacute; revue le calendrier et la progression des &eacute;v&eacute;nements mitotiques. Les duplications asynchrones des &eacute;quivalents &agrave; P. falciparum centrosome, les centriole plaques, sont &eacute;tablies et ceux-ci sont corr&eacute;l&eacute;s avec chromosome et les divisions nucl&eacute;aires dans un nouveau mod&egrave;le de P. falciparum schizogonie. Nos r&eacute;sultats d&#39;am&eacute;liorer la r&eacute;solution de ses phases au cours du d&eacute;veloppement de l&#39;IE &agrave; P. falciparum, montrant qu&#39;asynchrone, ind&eacute;pendamment de la division nucl&eacute;aire se produit pendant la schizogonie, avec les plaques centriolaire jouant un r&ocirc;le majeur dans la r&eacute;gulation de progression mitotique et le cycle cellulaire.

La progression de la cell cycle intra-&eacute;rythrocytaires de Plasmodium falciparum et le r&ocirc;le des plaques centriolaire dans la division mitotique asynchrone pendant schizogonie.

Der Zyklus der Zellteilung und Mitose von Intra-da (IE) Plasmodium Falciparum sind unzureichend erforscht Aspekte der Parasit Entwicklung die Malaria Molekulare Pathogenese beeinflussen. Insbesondere das Timing der mehrere L&uuml;cke (G), DNA-Synthese (S) und Chromosom Trennung (M) Phasen der Parasit Mitose sind nicht klar definiert, noch ob Genom-Abteilungen unmittelbar sind gefolgt von Spaltung von der Kernh&uuml;lle. Merkw&uuml;rdigerweise folgt Tochter Merozoite Zahlen nicht die geometrische Ausdehnung von parit&auml;tisch von bin&auml;ren Divisionen, schwierig zu erkl&auml;ren, mit das Standardmodell der Zellzykluskontrolle Ergebnis erwartet. Mit kontrollierten synchronisieren Techniken, konfokale Mikroskopie zu wichtigen Organellen und Fluoreszenz-in Situ-Hybridisierung (FISH), die Bewegungen und die Replikation der Gene und der Telomere, folgen visualisieren haben wir das Timing und die Progression der mitotischen Ereignisse genauer. Die asynchronen Wiederholungen von p. Falciparum Zentrosom Entsprechungen, die centriolar Plaques sind etabliert und diese mit Chromosom und nukleare Divisionen in ein neues Modell von p. Falciparum Schizogony korreliert sind. Unsere Ergebnisse verbessern die Aufl&ouml;sung der Zellzyklus und seinen Phasen w&auml;hrend der p. Falciparum IE Entwicklung zeigt, dass die asynchrone, unabh&auml;ngige nukleare Teilung w&auml;hrend der Schizogony, mit der centriolar Plaques, spielen eine wichtige Rolle bei der Regulierung der mitotischen Fortschreiten auftritt.

Das Fortschreiten der Intra-da Cell cycle von Plasmodium Falciparum und die Rolle der centriolar Plaques in asynchronen mitotische Teilung w&auml;hrend der Schizogony.

Il ciclo di divisione cellulare e la mitosi di intra-eritrocitari (IE) Plasmodium falciparum sono scarsamente capiti aspetti dello sviluppo del parassita che possono influenzare la patogenesi molecolare la malaria. In particolare, la temporizzazione del gap multiple (G), cromosoma separazione (M) fasi della mitosi parassita e sintesi del DNA (S) non sono ben definiti, n&eacute; se le divisioni del genoma sono immediatamente seguirono da scissione della busta nucleare. Curiosamente, figlia merozoite numeri non seguono l&#39;espansione geometrica previsto da un uguale numero di divisioni binarie, un risultato difficile da spiegare utilizzando il modello standard di regolazione del ciclo cellulare. Utilizzando tecniche di sincronizzazione controllata, microscopia confocale per visualizzare chiavi organelli e l&#39;ibridazione in situ (FISH) per seguire i movimenti e la replica dei geni e dei telomeri, noi abbiamo rianalizzato i tempi e la progressione degli eventi mitotici. Vengono stabilite le duplicazioni asincrone degli equivalenti centrosoma p. falciparum, le placche di centriolar, e queste sono correlate con cromosoma e divisioni nucleari in un nuovo modello di p. falciparum schizogonia. I nostri risultati migliorano la risoluzione del ciclo cellulare e sue fasi durante lo sviluppo del p. falciparum IE, mostrando che asincrona, indipendente divisione nucleare si verifica durante la schizogonia, con le placche centriolar, giocando un ruolo importante nella regolazione della progressione mitotica.

La progressione della cell cycle intra-eritrocitari del Plasmodium falciparum e il ruolo delle piastre centriolar in asincrono divisione mitotica durante schizogonia.

&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3068;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x8D64;&#x8840;&#x7403; (IE) &#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x75C5;&#x614B;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3082;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x90E8;&#x9580;&#x304C;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x6838;&#x819C;&#x306E;&#x958B;&#x88C2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7; (G) &#x306E; DNA &#x5408;&#x6210; (S) &#x3068;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x96E2; (M) &#x6BB5;&#x968E;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4E0D;&#x601D;&#x8B70;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x5A18;&#x306E;&#x30E1;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x6570;&#x5024;&#x7D50;&#x679C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x30D0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30EA;&#x90E8;&#x9580;&#x304B;&#x3089;&#x7B49;&#x3057;&#x3044;&#x6570;&#x5024;&#x3092;&#x671F;&#x5F85;&#x3057;&#x305F;&#x5E7E;&#x4F55;&#x5B66;&#x7684;&#x62E1;&#x5927;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x540C;&#x671F;&#x6CD5;, &#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3068;&#x86CD;&#x5149; in situ &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#xFF08;&#x9B5A;&#xFF09; &#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3084;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x5F93;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8996;&#x899A;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x5317;&#x304C;&#x3002;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x306F;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7B49;&#x4FA1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30AF;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3068;&#x6838;&#x90E8;&#x9580;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x672A;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x3001;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x6838;&#x5206;&#x88C2;&#x672A;&#x653E;&#x51FA;&#x4E2D;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA; &#x30D7;&#x30E9;&#x30AF;&#x3068;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;p. &#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B; IE &#x958B;&#x767A;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x5185;&#x306E; cell cycle &#x3068;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x5206;&#x88C2;&#x672A;&#x653E;&#x51FA;&#x4E2D;&#x3067;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA; &#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3002;

&#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC640; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; erythrocytic (IE) Plasmodium falciparum &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xBD84;&#xC790; &#xBCD1; &#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xC774;&#xD574; &#xCE21;&#xBA74;&#xC740;. &#xD2B9;&#xD788; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; (G) &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC04;&#xACA9;&#xC758; DNA &#xD569;&#xC131; (S) &#xBC0F; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC; (M) &#xB2E8;&#xACC4; &#xC798; &#xC815;&#xC758; &#xB41C;&#xB3C4; &#xD575; &#xBD09;&#xD22C;&#xC758; &#xBD84;&#xC5F4; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xAC8C;&#xB188; &#xBD80;&#xC11C; &#xC989;&#xC2DC; &#xC778;&#xC9C0;. &#xD638;&#xAE30;&#xC2EC;, &#xB538; merozoite &#xBC88;&#xD638; &#xAE30;&#xD558;&#xD559;&#xC801; &#xD655;&#xC7A5; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xD55C; &#xC22B;&#xC790; &#xC774;&#xC9C4; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC870;&#xC808;&#xC758; &#xD45C;&#xC900; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC608;&#xC0C1;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC5B4; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xAE30;&#xBC95;, &#xC8FC;&#xC694; organelles &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; (&#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;)&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; telomeres, &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD558;&#xB294; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xBC0F; mitotic &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589; re-analysed&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;. P. falciparum centrosome &#xB4F1;&#xAC00;&#xBB3C; centriolar &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C;&#xC758; &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30; &#xC911;&#xBCF5; &#xC124;&#xCE58; &#xB418; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC640; &#xD575; &#xBD84;&#xC5F4; P. falciparum schizogony&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xD638; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xBC0F; &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30;, &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xC6D0;&#xC790;&#xB825; &#xBD80;&#xBB38; mitotic &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; centriolar &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C;&#xC640; schizogony, &#xC911; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD398;&#xC774;&#xC9C0; P. falciparum IE &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xD5A5;&#xC0C1;.

Plasmodium falciparum&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; erythrocytic cell cycle &#xBC0F; schizogony &#xB3D9;&#xC548; &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30; mitotic &#xBD80;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC11C; centriolar &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;.

El ciclo de divisi&oacute;n celular y la mitosis de intra-eritroc&iacute;tica (IE) Plasmodium falciparum son mal entendidos los aspectos del desarrollo de par&aacute;sitos que afectan la patogenia molecular de la malaria. Espec&iacute;ficamente, la sincronizaci&oacute;n de la brecha m&uacute;ltiples (G), (S) de la s&iacute;ntesis de ADN y cromosoma separaci&oacute;n (M) fases de la mitosis de par&aacute;sito no est&aacute;n bien definidas, ni si las divisiones de genoma son inmediatamente seguido por clivaje de la envoltura nuclear. Curiosamente, hija merozoito n&uacute;meros no sigue la expansi&oacute;n geom&eacute;trica de igual n&uacute;mero de divisiones binarias, un resultado dif&iacute;cil de explicar utilizando el modelo est&aacute;ndar de la regulaci&oacute;n del ciclo celular. Mediante t&eacute;cnicas de sincronizaci&oacute;n controlada, microscop&iacute;a confocal para visualizar org&aacute;nulos claves e hibridaci&oacute;n fluorescente in situ (FISH) para seguir los movimientos y la replicaci&oacute;n de los genes y los tel&oacute;meros, se volvieron a hemos analizar el momento y la progresi&oacute;n de eventos mit&oacute;ticos. Se establecen las duplicaciones asincr&oacute;nicas de los equivalentes del centrosoma de p. falciparum, las placas centriolar, y &eacute;stos se correlacionan con el cromosoma y divisiones nucleares en un nuevo modelo de schizogony de p. falciparum. Nuestros resultados mejoran la resoluci&oacute;n del ciclo celular y sus fases durante el desarrollo de la IE de p. falciparum, mostrando que asincr&oacute;nica, independiente de la Divisi&oacute;n nuclear se produce durante la schizogony, con las placas centriolar juega un gran papel en la regulaci&oacute;n de la progresi&oacute;n de la mitosis.

La progresi&oacute;n de la cell cycle intra-eritroc&iacute;tica de Plasmodium falciparum y el papel de las placas centriolar en Divisi&oacute;n mit&oacute;tica asincr&oacute;nica durante schizogony.

&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; 1 (PfEMP1) &#x6297;&#x539F;&#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;IE&#xFF09;&#xFF0C;cytoadhesion &#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x4F5C;&#x7528;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x53D8;&#x5F02;&#x548C;&#x759F;&#x75BE;&#x514D;&#x75AB;&#x63A5;&#x79CD;&#x3002;&#x53D8;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x5171;&#x8BC6;&#x662F;&#x7531;&#x4E00;&#x4E2A; var &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A; PfEMP1 &#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x793A;&#x4E00;&#x6B21;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8861;&#x91CF; var mrna &#x8C08;&#x8BDD;&#x5185;&#x5BB9;&#x5B9E;&#x65F6; Q pcr&#x3001; &#x5206;&#x6790; var &#x57FA;&#x56E0;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x7531;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x9C7C;&#x548C;&#x76F4;&#x63A5;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F; PfEMP1 &#x4E0E; cytoadhesion &#x5728;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x6297;&#x4F53;&#x9009;&#x5B9A;&#x759F;&#x539F;&#x866B; 3 7 &#x514B;&#x9686;&#x682A;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x6D3B;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x3001; &#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x9ECF;&#x9644;&#x529B;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E00;&#x9009;&#x5B9A;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x671D;&#x670D;&#x540C;&#x65F6;&#x8868;&#x793A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; var &#x57FA;&#x56E0;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A; ie &#x6D4F;&#x89C8;&#x5668;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x548C;&#x751F;&#x7406;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x548C;&#x759F;&#x75BE;&#x53D1;&#x75C5;&#xFF0C;&#x6B64;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x671D;&#x670D;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4EE5;&#x7ED1;&#x5B9A; CD31/PECAM1 &#x548C; CD54/ICAM1 &#x5E76;&#x9075;&#x5B88;&#x4E24;&#x6B21;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6709;&#x5907;&#x9009;&#x6848;&#x6587; PfEMP1 &#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;PfEMP1 &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x8FBE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x9700;&#x8981;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x63A5;&#x53D7;&#x8303;&#x5F0F;&#x7684;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x4E92;&#x65A5; var &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;

&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C; PfEMP1 &#x6297;&#x539F;&#x5BF9;&#x5355;&#x4E2A;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x5171;&#x8868;&#x8FBE;&#x65B9;&#x4FBF;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; ICAM1 &#x548C; PECAM1&#x3002;

The Plasmodium falciparum erythrocyte membrane protein 1 (PfEMP1) antigens play a major role in cytoadhesion of infected erythrocytes (IE), antigenic variation, and immunity to malaria. The current consensus on control of variant surface antigen expression is that only one PfEMP1 encoded by one var gene is expressed per cell at a time. We measured var mRNA transcript levels by real-time Q-PCR, analysed var gene transcripts by single-cell FISH and directly compared these with PfEMP1 antigen surface expression and cytoadhesion in three different antibody-selected P. falciparum 3D7 sub-lines using live confocal microscopy, flow cytometry and in vitro adhesion assays. We found that one selected parasite sub-line simultaneously expressed two different var genes as surface antigens, on single IE. Importantly, and of physiological relevance to adhesion and malaria pathogenesis, this parasite sub-line was found to bind both CD31/PECAM1 and CD54/ICAM1 and to adhere twice as efficiently to human endothelial cells, compared to infected cells having only one PfEMP1 variant on the surface. These new results on PfEMP1 antigen expression indicate that a re-evaluation of the molecular mechanisms involved in P. falciparum adhesion and of the accepted paradigm of absolutely mutually exclusive var gene transcription is required.

Surface co-expression of two different PfEMP1 antigens on single plasmodium falciparum-infected erythrocytes facilitates binding to ICAM1 and PECAM1.

La prot&eacute;ine de membrane &eacute;rythrocytaire Plasmodium falciparum 1 (PfEMP1) antig&egrave;nes jouent un r&ocirc;le majeur dans la cytoadhesion des &eacute;rythrocytes infect&eacute;s (IE), la variation antig&eacute;nique et l&#39;immunit&eacute; au paludisme. Le consensus actuel sur le contr&ocirc;le de l&#39;expression de l&#39;antig&egrave;ne de surface du type variant est que seul PfEMP1 cod&eacute;e par un g&egrave;ne de var est exprim&eacute; par cellule &agrave; la fois. Nous avons mesur&eacute; les niveaux de transcription ARNm var par Q-PCR en temps r&eacute;el, analys&eacute; var transcription des g&egrave;nes de poisson unicellulaire et directement compar&eacute;e avec l&#39;expression de surface de l&#39;antig&egrave;ne PfEMP1 et cytoadhesion en trois sous-lignes diff&eacute;rents anticorps s&eacute;lectionn&eacute;s P. falciparum 3 7 &agrave; l&#39;aide de direct microscopie confocale, cytom&eacute;trie en flux et tests d&#39;adh&eacute;rence in vitro. Nous avons trouv&eacute; qu&#39;un parasite s&eacute;lectionn&eacute; deux g&egrave;nes diff&eacute;rents var de sous-ligne en m&ecirc;me temps exprim&eacute; comme antig&egrave;nes de surface, sur IE seul. Ce qui est important, et de pertinence physiologique &agrave; la pathog&eacute;n&egrave;se d&#39;adh&eacute;rence et de la malaria, cette sous-ligne parasite a &eacute;t&eacute; retrouv&eacute;e &agrave; lier les deux CD31/PECAM1 et CD54/ICAM1 et &agrave; adh&eacute;rer deux fois plus que les cellules endoth&eacute;liales efficacement aux humains, par rapport aux cellules infect&eacute;es apr&egrave;s avoir qu&#39;une seule variante de PfEMP1 sur la surface. Ces nouveaux r&eacute;sultats sur l&#39;expression de l&#39;antig&egrave;ne PfEMP1 indiquent qu&#39;il faut une r&eacute;&eacute;valuation des m&eacute;canismes mol&eacute;culaires impliqu&eacute;s dans l&#39;adh&eacute;sion &agrave; P. falciparum et du paradigme de la transcription du g&egrave;ne var absolument mutuellement accept&eacute;.

Surface co-expression de deux antig&egrave;nes diff&eacute;rents de PfEMP1 sur les &eacute;rythrocytes seul plasmodium falciparum-infect&eacute;s facilite la liaison &agrave; ICAM1 et PECAM1.

Das Plasmodium Falciparum Erythrozyten Membranprotein 1 (PfEMP1) Antigene spielen eine wichtige Rolle im Cytoadhesion der infizierten Erythrozyten (IE), Antigene Variation und Immunit&auml;t gegen Malaria. Der aktuelle Konsens zur Kontrolle der variant Oberfl&auml;chenantigen Ausdruck ist, dass nur ein PfEMP1 eine Var-Gen codiert pro Zelle zu einem Zeitpunkt ausgedr&uuml;ckt wird. Wir Var-mRNA-Transkript-Stufen von Echtzeit-Q-PCR gemessen und analysiert Var gen Abschriften von Einzelzellen-FISH und direkt verglichen diese mit PfEMP1 Antigen Oberfl&auml;che Ausdruck und Cytoadhesion in drei verschiedenen Antik&ouml;rper-ausgew&auml;hlte p. Falciparum 3 7 Sub-lines mit live confocal Mikroskopie, Durchflusszytometrie und in-vitro Adh&auml;sion Assays. Wir fanden, dass ein Parasit der ausgew&auml;hlten Unterthema gleichzeitig ausgedr&uuml;ckt zwei verschiedene Var Gene als OBERFL&Auml;CHENANTIGENE, auf einzelne IE. Wichtig ist, und von physiologischer Bedeutung f&uuml;r Adh&auml;sion und Malaria Pathogenese dieser Parasit Unterthema fand CD31/PECAM1 und CD54/ICAM1 binden und halten doppelt so effizient zu menschliche Endothelzellen, verglichen mit infizierten Zellen haben nur eine PfEMP1 Variante auf der Oberfl&auml;che. Diese neuen Ergebnisse auf PfEMP1 Antigen Ausdruck anzugeben, dass eine Neubewertung der molekularen Mechanismen p. Falciparum Adh&auml;sion beteiligt und des akzeptierten Paradigmas der absolut gegenseitig Var gen Transkription erforderlich ist.

Oberfl&auml;che Koexpression von zwei verschiedenen PfEMP1 Antigenen auf einzelne Plasmodium Falciparum infizierten Erythrozyten erleichtert das Binden an ICAM1 und PECAM1.

La proteina di membrana eritrocitaria di Plasmodium falciparum 1 (PfEMP1) antigeni giocano un ruolo importante nella cytoadhesion degli eritrociti infetti (IE), variazione antigenica e l&#39;immunit&agrave; alla malaria. L&#39;attuale consenso sul controllo dell&#39;espressione dell&#39;antigene di superficie variante &egrave; che solo uno PfEMP1 codificato da un gene di var &egrave; espresso per ogni cella in un momento. Abbiamo misurato i livelli di trascrizione di mRNA var da Q-PCR in tempo reale, analizzate le trascrizioni del gene var da pesce a cella singola e direttamente confrontato questi con espressione superficie PfEMP1 dell&#39;antigene e cytoadhesion in tre differenti anticorpi selezionato p. falciparum 7 3 sub-lines utilizzando live microscopia confocal, citometria a flusso e dosaggi di adesione in vitro. Abbiamo trovato che un parassita selezionato due geni differenti var parte contemporaneamente espresso come antigeni superficiali, su IE unico. Importante, e di rilevanza fisiologica alla patogenesi della malaria e di adesione, questa parte del parassita &egrave; stato trovato per associare sia CD31/PECAM1 e CD54/ICAM1 e aderire due volte pi&ugrave; efficiente a cellule endoteliali, rispetto alle cellule infette, avendo solo una variante PfEMP1 sulla superficie. Questi nuovi risultati sull&#39;espressione dell&#39;antigene PfEMP1 indicano che una rivalutazione dei meccanismi molecolari coinvolti nell&#39;adesione di p. falciparum e del paradigma accettato della trascrizione del gene var escludono assolutamente &egrave; necessaria.

Superficie co-expression di due diversi antigeni PfEMP1 su eritrociti singolo plasmodium falciparum-infettati facilita l&#39;associazione di ICAM1 e PECAM1.

&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 1 (PfEMP1) &#x6297;&#x539F;&#x306F;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x8D64;&#x8840;&#x7403; &#xFF08;IE&#xFF09; &#x306E; cytoadhesion &#x3067;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x6297;&#x539F;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x3078;&#x306E;&#x8010;&#x6027;&#x3002;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;1 &#x3064;&#x306E; var &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; 1 &#x3064;&#x3060;&#x3051;&#x306E; PfEMP1 &#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;var mRNA &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; &#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; Q PCR &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3067;&#x5358;&#x4E00;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x9B5A;&#x306E; var &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3001;PfEMP1 &#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x8868;&#x73FE;&#x3068; cytoadhesion &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073; in vitro &#x3067;&#x4ED8;&#x7740;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; 3 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x9078;&#x629E; p. &#x306E; falciparum 3 7 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x5358;&#x4E00; IE &#x3067;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B; var &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x305D;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x305F;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x3001;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; CD31/PECAM1 &#x3068; CD54/ICAM1 &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x4ED8;&#x7740;&#x3059;&#x308B;&#x500D;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3060;&#x3051;&#x306E; PfEMP1 &#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; PfEMP1 &#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x7D76;&#x5BFE;&#x306B;&#x76F8;&#x4E92;&#x306B;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306A; var &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x53D7;&#x3051;&#x5165;&#x308C;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x518D;&#x8A55;&#x4FA1;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x5358;&#x4E00;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x4E0A;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B; PfEMP1 &#x6297;&#x539F;&#x306E; ICAM1 &#x3068; PECAM1 &#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Plasmodium falciparum &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 (PfEMP1) &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; (IE)&#xC758; cytoadhesion &#xC8FC;&#xC694; &#xC5ED;&#xD560; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBCC0;&#xC774; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xBA74;&#xC5ED;. &#xBCC0;&#xD615; &#xD45C;&#xBA74; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC2DD;&#xC758; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xD604;&#xC7AC; &#xD569;&#xC758; &#xD55C; &#xBC88;&#xC5D0; &#xD558;&#xB098;&#xC758; PfEMP1 &#xD55C; var &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xD638;&#xD654; &#xC140;&#xB2F9; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; Q PCR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; var mRNA &#xB300; &#xBCF8; &#xC218;&#xC900; &#xCE21;&#xC815; var &#xC9C4; &#xB179;&#xCDE8; &#xB85D; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; PfEMP1 &#xD56D; &#xC6D0; &#xD45C;&#xBA74; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;, cytometry &#xC811;&#xCC29; &#xCCB4; &#xC678; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC120;&#xD0DD; P. falciparum 3D 7 sub-lines&#xC5D0; cytoadhesion&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC; &#xADF8; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD; &#xB41C; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD558;&#xC704; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; var &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xBA74; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; IE&#xC5D0;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xBCD1;&#xC744; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801;&#xC778; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC758;&#xC774; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD558;&#xC704; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4; CD31/PECAM1 &#xBC0F; CD54/ICAM1 &#xBC0F; &#xC900;&#xC218;&#xB97C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xB450; &#xBC88; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD558;&#xB098;&#xC758; PfEMP1 &#xBCC0;&#xC885;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. PfEMP1 &#xD56D; &#xC6D0; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xACB0;&#xACFC; P. falciparum &#xC811;&#xCC29;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758;&#xC640; &#xC808;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC2DC; var &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xB41C; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC758; &#xC7AC;&#xD3C9;&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD568;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xC77C; plasmodium falciparum &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; PfEMP1 &#xD56D; &#xC6D0; &#xD45C;&#xBA74; co-expression ICAM1 &#xBC0F; pecam1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La prote&iacute;na de la membrana del eritrocito Plasmodium falciparum 1 (PfEMP1) ant&iacute;genos juegan un papel importante en la cytoadhesion de eritrocitos infectados (IE), variaci&oacute;n antig&eacute;nica e inmunidad a la malaria. El consenso actual sobre el control de la expresi&oacute;n del ant&iacute;geno superficial de la variante es que solamente un PfEMP1 codificada por un gen de var se expresa por la c&eacute;lula en un momento. Se midieron los niveles de transcripci&oacute;n de mRNA var por Q-PCR en tiempo real, analizaron var transcritos de genes por peces unicelular y compar&oacute; directamente con la expresi&oacute;n superficial del ant&iacute;geno PfEMP1 y cytoadhesion en tres subl&iacute;neas de diferentes seleccionados por el anticuerpo p. falciparum 3 7 usando microscopia confocal viva, citometr&iacute;a de flujo y ensayos de adherencia in vitro. Hemos encontrado un par&aacute;sito seleccionado dos genes de diferentes var subl&iacute;nea expresada simult&aacute;neamente como ant&iacute;genos de superficies, en IE solo. Lo importante, y de relevancia fisiol&oacute;gica a la patogenesia de la adherencia y la malaria, esta subl&iacute;nea par&aacute;sito fue encontrada para obligar a CD31/PECAM1 tanto CD54/ICAM1 y adherir el doble de c&eacute;lulas endoteliales eficientemente a humanas, en comparaci&oacute;n con tener s&oacute;lo una variante de PfEMP1 en la superficie de c&eacute;lulas infectadas. Estos nuevos resultados sobre la expresi&oacute;n del ant&iacute;geno PfEMP1 indican que se requiere una reevaluaci&oacute;n de los mecanismos moleculares implicados en la adhesi&oacute;n de p. falciparum y el paradigma aceptado de la transcripci&oacute;n del gen de var absolutamente excluyentes.

Superficie coexpresi&oacute;n de dos diversos ant&iacute;genos PfEMP1 en eritrocitos de solo plasmodium falciparum infectados favorece la fijaci&oacute;n ICAM1 y PECAM1.

Elena Ronander

Centre for Medical Parasitology,
Department of International Health,
Immunology & Microbiology,
Faculty of Health Sciences,
Centre for Medical Parasitology, Department of International Health, Immunology & Microbiology, Faculty of Health Sciences

University of Copenhagen

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Elena Ronander

Centre for Medical Parasitology,Department of International Health,Immunology & Microbiology,Faculty of Health Sciences,Centre for Medical Parasitology, Department of International Health, Immunology & Microbiology, Faculty of Health Sciences

University of Copenhagen

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Centre for Medical Parasitology,
Department of International Health,
Immunology & Microbiology,
Faculty of Health Sciences,
Centre for Medical Parasitology, Department of International Health, Immunology & Microbiology, Faculty of Health Sciences