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Isolation of Microvascular Endothelial Tubes from Mouse Resistance Arteries

The control of blood flow by the resistance vasculature regulates the supply of oxygen and nutrients concomitant with the removal of metabolic ...

University of Missouri

The interplay between peritoneal mesothelial cells and ovarian cancer cells is critical for the initiation and peritoneal dissemination of, and ascites formation in, ovarian cancer. The production of lysophosphatidic acid (LPA) by both peritoneal mesothelial cells and ovarian cancer cells has been shown to promote metastatic phenotype in ovarian cancer. Herein, we report that exogenous addition or ectopic overexpression of the matricellular protein SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) significantly attenuated LPA-induced proliferation, chemotaxis, and invasion in both highly metastatic SKOV3 and less metastatic OVCAR3 ovarian cancer cell lines. SPARC appears to modulate these functions, at least in part, through the regulation of LPA receptor levels and the attenuation of extracellular signal-regulated kinase (ERK) 1/2 and protein kinase B/AKT signaling. Moreover, our results show that SPARC not only significantly inhibited both basal and LPA-induced interleukin (IL) 6 production in both cell lines but also attenuated IL-6-induced mitogenic, chemotactic, and proinvasive effects, in part, through significant suppression of ERK1/2 and, to a lesser extent, of signal transducers and activators of transcription 3 signaling pathways. Our results strongly suggest that SPARC exerts a dual inhibitory effect on LPA-induced mesothelial-ovarian cancer cell crosstalk through the regulation of both LPA-induced IL-6 production and function. Taken together, our findings underscore the use of SPARC as a potential therapeutic candidate in peritoneal ovarian carcinomatosis.

SPARC inhibits LPA-mediated mesothelial-ovarian cancer cell crosstalk.

The matricellular protein secreted protein acidic and rich in cysteine (SPARC) modulates cell adhesion, proliferation, matrix deposition, and tissue remodeling. SPARC has been shown to regulate the expression of collagen type I and transforming growth factor-beta1 in mesangial cells and to be highly expressed during tubulointerstitial fibrosis in rat angiotensin (ANG) II infusion models. We hypothesized that SPARC is a downstream effector of ANG II and that loss of host SPARC function provides a protective effect on renal damage and fibrosis associated with ANG II hypertension. Our results revealed that cultured primary mesangial cells displayed a concentration-dependent increase in SPARC expression in response to ANG II. After a 14-day chronic infusion of ANG II, hypertensive SPARC-null mice exhibited significantly attenuated levels of urinary and renal indicators of oxidative stress and inflammation and decreased renal perivascular and tubulointerstitial fibrosis relative to wild-type hypertensive controls. Moreover, the observed renal protective changes in SPARC-null mice were found to be independent of blood pressure. These results identify SPARC as an effector of ANG II signaling and suggest an important role for SPARC in mediating ANG II-induced oxidative stress, inflammation, and fibrosis.

Secreted protein acidic and rich in cysteine deficiency ameliorates renal inflammation and fibrosis in angiotensin hypertension.

Malignant ascites is a major source of morbidity and mortality in ovarian cancer patients. It functions as a permissive reactive tumor-host microenvironment and provides sustenance for the floating tumor cells through a plethora of survival/metastasis-associated molecules. Using a syngeneic, immunocompetent model of peritoneal ovarian carcinomatosis in SP(-/-) mice, we investigated the molecular mechanisms implicated in the interplay between host secreted protein acidic and rich in cysteine (SPARC) and ascitic fluid prosurvival/prometastasis factors that result in the significantly augmented levels of vascular endothelial growth factor (VEGF) and matrix metalloproteinases (MMP). Ascitic fluid-enhanced ID8 invasiveness was mediated through VEGF via a positive feedback loop with MMP-2 and MMP-9 and through activation of alpha(v) and beta(1) integrins. Host SPARC down-regulated the VEGF-MMP axis at the transcriptional and posttranscriptional levels. In vitro, SPARC attenuated the basal as well as VEGF-induced integrin activation in tumor cells. SPARC inhibited the VEGF- and integrin-mediated ID8 proliferation in vitro and significantly suppressed their tumorigenicity in vivo. Relative to SP(+/+), SP(-/-) ascitic fluid contained significantly higher levels of bioactive lipids and exerted stronger chemotactic, proinvasive, and mitogenic effects on ID8 cells in vitro. SP(-/-) ascites also contained high levels of interleukin-6, macrophage chemoattractant protein-1, and 8-isoprostane (prostaglandin F(2)alpha) that were positively correlated with extensive infiltration of SP(-/-) ovarian tumors and ascites with macrophages. In summary, our findings strongly suggest that host SPARC normalizes the microenvironment of ovarian cancer malignant ascites through down-regulation of the VEGF-integrin-MMP axis, decreases the levels and activity of bioactive lipids, and ameliorates downstream inflammation.

Normalization of the ovarian cancer microenvironment by SPARC.

Epigenetic silencing of tumor suppressor genes is a new focus of investigation in the generation and proliferation of carcinomas. Secreted protein acidic and rich in cysteine (SPARC) is reportedly detrimental to the growth of ovarian cancer cells and has been shown to be epigenetically silenced in several cancers. We hypothesized that SPARC is downregulated in ovarian cancer through aberrant promoter hypermethylation. To that end, we analyzed SPARC expression in ovarian cancer cell lines and investigated the methylation status of the Sparc promoter using methylation-specific polymerase chain reaction. Our results show that SPARC mRNA expression is decreased in three (33%) and absent in four (44%) of the nine ovarian cancer cell lines studied, which correlated with hypermethylation of the Sparc promoter. Treatment with the demethylating agent 5-aza-2'-deoxycytidine rescued SPARC mRNA and protein expression. Addition of exogenous SPARC, as well as ectopic expression by an adenoviral vector, resulted in decreased proliferation of ovarian cancer cell lines. Investigation of primary tumors revealed that the Sparc promoter is methylated in 68% of primary ovarian tumors and that the levels of SPARC protein decrease as the disease progresses from low to high grade. Lastly, de novo methylation of Sparc promoter was shown to be mediated by DNA methyltransferase 3a. These results implicate Sparc promoter methylation as an important factor in the genesis and survival of ovarian carcinomas and provide new insights into the potential use of SPARC as a novel biomarker and/or treatment modality for this disease.

Aberrant promoter methylation of SPARC in ovarian cancer.

&#x7814;&#x7A76;&#x7ECF;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x9972;&#x6599;&#x52A8;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027; (EC) &#x7BA1;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5206;&#x79BB;&#x9972;&#x6599; (5-9 mo&#xFF0C;25-35 g) &#x7684;&#x7537;&#x6027;&#x548C;&#x5973;&#x6027; C57BL/6 &#x5C0F;&#x9F20;&#x52A8;&#x8109;&#x7684;&#x8179;&#x90E8;&#x808C;&#x8089;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5047;&#x8BBE;&#x8BE5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6; ([Ca(2+)](i)) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x54CD;&#x5E94;&#x5C06;&#x968F;&#x6E29;&#x5EA6;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x5B8C;&#x597D;&#x7684;&#x7EDF;&#x7BA1; (&#x957F;&#x5EA6;&#xFF1A; 1-2 &#x6BEB;&#x7C73;&#x3001; &#x5BBD;&#x5EA6;&#xFF1A; 65-80 &mu; m&#xFF09; &#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x4F7F;&#x7528;&#x6E29;&#x548C;&#x7684;&#x9176;&#x6D88;&#x5316;&#x4E0E;&#x7814;&#x5236;&#x5220;&#x9664;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x7EDF;&#x7BA1;&#x662F;&#x62C5;&#x4FDD;&#x5728;&#x4F1A;&#x8BAE;&#x5385;&#x548C; superfused (&#x5BA4;&#x6E29;) 24&#x3001; 32&#x3001; &#x6216; 37 &deg; c&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; fura 2 &#x67D3;&#x6599; [Ca(2+)](i) &#x662F;&#x88AB;&#x76D1;&#x89C6; &#xFF08;&#x6BD4;&#x7387;&#x5728; 340-380 nm &#x6CE2;&#x957F;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#xFF09; &#x5728;&#x4F11;&#x606F;&#x548C;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E38;&#x5242;&#x91CF;&#x7684; ACh (&#x5230; 200 &mu; m o 20 nmol)&#x3002;&#x7EDF;&#x7BA1;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x5B8C;&#x6574;&#x4FDD;&#x5B58;&#x5728; 24 &#x548C; 32 &deg; C&#x57FA;&#x4E8E;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E3A; fura 2 &#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x7ECF; K(d) &#x503C; (174 &#x5728; 24 &deg; C &#x548C; 146 nM nM &#x5728; 32 &deg; C)&#x3001; &#x4F11;&#x606F; [Ca(2+)](i) &#x4FDD;&#x6301;&#x7A33;&#x5B9A;&#x4E3A; 180 &#x5206;&#x949F;&#xFF0C;24 &#x548C; 32 &deg; C (27 &plusmn; 4 &#x548C; 34 &plusmn; 2 nM&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;)&#xFF0C;&#x4E0E; ACh &#x5CF0;&#x503C;&#x54CD;&#x5E94; (20 &mu; m o) &#x589E;&#x52A0;&#x4ECE; &sim;220 nM &#x5728; 24 &deg; C &#x5230; 32 &deg; c &sim;500 nM (P &lt; 0.05)&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5DEE;&#x522B; ACh &#x7EDF;&#x7BA1;&#x4ECE;&#x7537;&#x6027;&#x4E0E;&#x5973;&#x6027;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7B54;&#x590D;&#x4E2D;&#x3002;&#x65F6;&#x7EDF;&#x7BA1;&#x88AB;&#x4FDD;&#x6301;&#x5728; 37 &deg; C &#xFF08;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x6E29;&#x5EA6;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F11;&#x606F; [Ca(2+)](i) &#x589E;&#x52A0;&#x4E86; &sim;30%&#x5728; 15 &#x5206;&#x949F;&#x5185;&#x548C;&#x4E2A;&#x522B; ECs &#x4E4B;&#x95F4;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6536;&#x56DE;&#x5E76;&#x5F62;&#x6210;&#x6324;&#x538B;&#x67D3;&#x6599;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x6392;&#x9664;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7A7A;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x7EDF;&#x7BA1;&#x4F7F;&#x7ECF;&#x8981;&#x8BA1;&#x7B97;&#x5728;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9972;&#x6599;&#x52A8;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x7531;&#x4E8E;&#x5927;&#x7EA6; 32 &#x4E0E; 24 &deg; C &#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#x5F97;&#x5230;&#x52A0;&#x5F3A;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x7EDF;&#x7BA1;&#x5728; 37 &deg; C &#x7684;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x6392;&#x9664;&#x5178;&#x578B;&#x4F53;&#x6E29;&#x5728;&#x5176;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x5BF9;&#x5F62;&#x6001;&#x5B8C;&#x6574;&#x548C; Ca&sup2;&#x207A; &#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5206;&#x79BB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9972;&#x6599;&#x52A8;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7BA1;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

To study Ca(2+) signaling in the endothelium of murine feed arteries, we determined the in vitro stability of endothelial cell (EC) tubes freshly isolated from abdominal muscle feed arteries of male and female C57BL/6 mice (5-9 mo, 25-35 g). We tested the hypothesis that intracellular Ca(2+) concentration ([Ca(2+)](i)) responses to muscarinic receptor activation would increase with temperature. Intact EC tubes (length: 1-2 mm, width: 65-80 Î¼m) were isolated using gentle enzymatic digestion with trituration to remove smooth muscle cells. A freshly isolated EC tube was secured in a chamber and superfused at 24 (room temperature), 32, or 37Â°C. Using fura-2 dye, [Ca(2+)](i) was monitored (ratio of fluorescence at 340- to 380-nm wavelength) at rest and in response to bolus doses of ACh (20 nmol to 200 Î¼mol). The morphological integrity of EC tubes was preserved at 24 and 32Â°C. Based on the Ca(2+) K(d) values we determined for fura-2 (174 nM at 24Â°C and 146 nM at 32Â°C), resting [Ca(2+)](i) remained stable for 180 min at both 24 and 32Â°C (27 Â± 4 and 34 Â± 2 nM, respectively), with peak responses to ACh (20 Î¼mol) increasing from âˆ¼220 nM at 24Â°C to âˆ¼500 nM at 32Â°C (P < 0.05). There was no difference in responses to ACh between EC tubes from male versus female mice. When EC tubes were maintained at 37Â°C (typical in vivo temperature), resting [Ca(2+)](i) increased by âˆ¼30% within 15 min, and gaps formed between individual ECs as they retracted and extruded dye, precluding further study. We conclude that EC tubes enable Ca(2+) signaling to be evaluated in the freshly isolated endothelium of murine feed arteries. While Ca(2+) responses are enhanced by approximately twofold at 32 versus 24Â°C, the instability of EC tubes at 37Â°C precludes their study at typical body temperature.

Temperature effects on morphological integrity and CaÂ²âº signaling in freshly isolated murine feed artery endothelial cell tubes.

Pour &#xE9;tudier Ca (2 +) de signalisation dans l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium des art&#xE8;res d&#x26;#39;alimentation murins, nous avons d&#xE9;termin&#xE9; la stabilit&#xE9; in vitro de cellules endoth&#xE9;liales (CE) des tubes fra&#xEE;chement isol&#xE9;s &#xE0; partir abdominales art&#xE8;res d&#x26;#39;alimentation musculaires de souris C57BL m&#xE2;le et femelle / 6 souris (5-9 mois, 25-35 g). Nous avons test&#xE9; l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se selon laquelle intracellulaire de Ca (2 +) de concentration ([Ca (2 +)] (i)) des r&#xE9;ponses &#xE0; l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs muscariniques augmenterait avec la temp&#xE9;rature. Intact tubes EC (longueur: 1-2 mm, largeur: 65-80 um) ont &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;s en utilisant douce digestion enzymatique avec trituration pour enlever les cellules musculaires lisses. Un tube fra&#xEE;chement isol&#xE9;es CE a &#xE9;t&#xE9; obtenu dans une chambre et perfus&#xE9;s &#xE0; 24 (temp&#xE9;rature ambiante), 32 ou 37 &#xB0; C. Utilisation de fura-2 colorant, [Ca (2 +)] (i) a &#xE9;t&#xE9; suivie (ratio de fluorescence &#xE0; 340 - &#xE0; 380 nm de longueur d&#x26;#39;onde-) au repos et en r&#xE9;ponse &#xE0; des bolus de ACh (20 nmol &#xE0; 200 umol). L&#x26;#39;int&#xE9;grit&#xE9; morphologique des tubes EC a &#xE9;t&#xE9; conserv&#xE9; &#xE0; 24 et 32 &#x200B;&#x200B;&#xB0; C. Bas&#xE9; sur le Ca (2 +) K (d) les valeurs, nous avons d&#xE9;termin&#xE9; pour fura-2 (174 nM &#xE0; 24 &#xB0; C et 146 nM &#xE0; 32 &#xB0; C), reposant [Ca (2 +)] (i) est rest&#xE9; stable &#xE0; 180 min &#xE0; la fois 24 et 32 &#x200B;&#x200B;&#xB0; C (27 &#xB1; 4 et 34 &#xB1; 2 nM, respectivement), avec des r&#xE9;ponses de pointe &#xE0; l&#x26;#39;ACh (20 pmol), l&#x26;#39;augmentation de ~ 220 nM &#xE0; 24 &#xB0; C &#xE0; environ 500 nM &#xE0; 32 &#xB0; C (P &#x26;lt; 0,05). Il n&#x26;#39;y avait pas de diff&#xE9;rence dans les r&#xE9;ponses &#xE0; l&#x26;#39;ACh entre les tubes de la CE de souris m&#xE2;les et femelles. Lorsque les tubes de la CE ont &#xE9;t&#xE9; maintenues &#xE0; 37 &#xB0; C (typique de la temp&#xE9;rature in vivo), de repos [Ca (2 +)] (i) a augment&#xE9; d&#x26;#39;environ 30% dans les 15 min, et les lacunes form&#xE9; entre l&#x26;#39;individu ECS en tant que ils sont revenus et le colorant extrud&#xE9;, ce qui exclut une &#xE9;tude plus approfondie. Nous concluons que CE tubes enable Ca (2 +) de signalisation &#xE0; &#xEA;tre &#xE9;valu&#xE9;s dans l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium des art&#xE8;res fra&#xEE;chement isol&#xE9;es d&#x26;#39;alimentation murins. Tandis que le CA (2 +) les r&#xE9;ponses sont am&#xE9;lior&#xE9;es d&#x26;#39;environ double &#xE0; 32 contre 24 &#xB0; C, l&#x26;#39;instabilit&#xE9; des tubes EC &#xE0; 37 &#xB0; C emp&#xEA;che leur &#xE9;tude &#xE0; la temp&#xE9;rature corporelle typique.

Effets de la temp&#xE9;rature sur l&#x26;#39;int&#xE9;grit&#xE9; morphologique et Ca &#xB2; &#x207A; Signalisation fra&#xEE;chement isol&#xE9;es murins Tubes art&#xE8;re cellulaires Flux endoth&#xE9;liales

Ca(2+) Signalisierung in das Endothel der murinen Futtermittel Arterien, wir entschlossen die in-vitro-Stabilit&auml;t der endothelial Zellen zu studieren (EG) R&ouml;hren frisch aus Bauchmuskel feed Arterien von m&auml;nnlichen und weiblichen C57BL/6 M&auml;usen (5-9 Mo, 25-35 g) isoliert. Wir testeten der Hypothese, dass intrazellul&auml;re Ca(2+) Konzentration ([Ca(2+)](i)) Antworten zu diesem Rezeptor-Aktivierung mit Temperatur erh&ouml;hen w&uuml;rde. Intakt EG-Schl&auml;uche (L&auml;nge: 1-2 mm, Breite: 65-80 &mu;m) wurden isoliert mit sanften enzymatische Verdauung mit Trituration glatten Muskelzellen zu entfernen. Ein frisch isolierten EG-Rohr war in eine Kammer gesichert und superfused bei 24 (Raumtemperatur), 32 oder 37 &deg; C. Mit Fura-2 Farbstoff, [Ca(2+)](i) war &uuml;berwachten (Verh&auml;ltnis von Fluoreszenz bei 340 - 380 nm Wellenl&auml;nge) in Ruhe und als Reaktion Bolus Dosen von ACh (20 Nmol bis 200 &mu;mol). Die morphologische Integrit&auml;t der EG-R&ouml;hren wurde erhalten, 24 und 32 &deg; C. Anhand der Ca(2+)-K(d)-Werte, die wir f&uuml;r Fura-2 bestimmt (174 nM bei 24 &deg; C und 146 nM bei 32 &deg; C), ruhelosigkeit [Ca(2+)](i) 180 min bei sowohl 24 und 32 &deg; C stabil geblieben (27 &plusmn; 4 und 34 &plusmn; 2 nM, beziehungsweise), mit Spitze Antworten auf ACh (20 &mu;mol) stieg von &sim;220 nM bei 24 &deg; C bis &sim;500 nM bei 32 &deg; C (P &lt; 0,05). Es gab keinen Unterschied in Antworten auf ACh zwischen EG-R&ouml;hren Male gegen weibliche M&auml;use. Als EG-Rohre gewartet wurden bei 37 &deg; C (typische in-vivo-Temperatur), ruhelosigkeit [Ca(2+)](i) &sim;30 % innerhalb von 15 min gestiegen und L&uuml;cken zwischen einzelnen ECs gebildet, wie sie zur&uuml;ckgezogen und Farbstoff extrudierte, dass weitere Studie. Wir schlie&szlig;en, dass die EG-R&ouml;hren Ca(2+) Signalisierung in das frisch isolierten Endothel der murinen Futtermittel Arterien ausgewertet werden k&ouml;nnen. W&auml;hrend Ca(2+) Antworten von etwa doppelte um 32 gegen 24 &deg; C gesteigert werden, schlie&szlig;t die Instabilit&auml;t der EG-R&ouml;hrchen bei 37 &deg; C ihre Studie, die bei typischen K&ouml;rpertemperatur.

Temperatureinfl&uuml;sse auf morphologischen Integrit&auml;t und Ca&sup2;&#x207A; signalisieren in frisch isoliert Murine-Feed-Arterie endothelial Zellen Rohre.

A studiare Ca(2+) segnalazione nell&#39;endotelio delle arterie mangimi murine, abbiamo determinato la stabilit&agrave; in vitro di cellule endoteliali (CE) tubi appena isolato dal muscolo addominale arterie dei topi C57BL/6 maschi e femmine (mo 5-9, 25-35 g) di alimentazione. Abbiamo testato l&#39;ipotesi che concentrazione intracellulare di Ca(2+) ([Ca(2+)](i)) risposte alla attivazione del recettore muscarinico aumenterebbe con la temperatura. Tubi EC intatte (lunghezza: 1-2 mm, larghezza: 65-80 &mu;m) sono stati isolati mediante digestione enzimatica delicato con triturazione per rimuovere le cellule muscolari lisce. Un tubo CE appena isolato &egrave; stato fissato in una camera e superfused a 24 (temperatura ambiente), 32 o 37 &deg; C. Usando tintura fura-2, [Ca(2+)](i) &egrave; stato monitorato (rapporto di fluorescenza a lunghezza d&#39;onda di 340-380 nm) a riposo e in risposta a dosi in bolo di ACh (20 nmol per 200 &mu;mol). L&#39;integrit&agrave; morfologica dei tubi CE &egrave; stato conservato a 24 e 32 &deg; C. Sulla base dei valori Ca(2+) K(d) abbiamo determinato per fura-2 (174 nM a 24 &deg; C e 146 nM a 32 &deg; C), riposo [Ca(2+)](i) &egrave; rimasto stabile per 180 min a 24 e 32 &deg; C (27 &plusmn; 4 e 34 &plusmn; 2 nM, rispettivamente), con risposte di picco a ACh (20 &mu;mol) aumentando da &sim;220 nM a 24 &deg; C a &sim;500 nM a 32 &deg; C (P &lt; 0,05). Non non c&#39;era alcuna differenza nelle risposte di ACh tra tubi CE da maschio contro topi femminili. Quando CE tubi sono stati mantenuti a 37 &deg; C (temperatura tipica in vivo), riposo [Ca(2+)](i) aumentato di &sim;30% entro 15 min e le lacune formate tra singoli ECs poich&egrave; retratto ed estruso colorante, precludendo ulteriore studio. Concludiamo che CE tubi abilitare Ca(2+) segnalazione venga valutata nell&#39;endotelio delle arterie mangimi murine appena isolato. Mentre le risposte Ca(2+) sono arricchite da circa duplice a 32 versus 24 &deg; C, l&#39;instabilit&agrave; dei tubi CE a 37 &deg; C preclude loro studio alla temperatura tipica del corpo.

Effetti della temperatura sulla integrit&agrave; morfologica e Ca&sup2;&#x207A; segnalazione in appena isolato murino feed tubi delle cellule endoteliali dell&#39;arteria.

&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x52D5;&#x8108;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x96C4;&#x3068;&#x96CC;C57BL / 6&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#xFF08;5-9&#x30AB;&#x6708;&#x306E;&#x8179;&#x90E8;&#x7B4B;&#x8089;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x52D5;&#x8108;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;EC&#xFF09;&#x7BA1;&#x306E;in vitro&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;25&#x301C;35&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;[Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;]&#xFF08;i&#xFF09;&#xFF09;&#x306F;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;EC&#x7BA1;&#xFF08;&#x9577;&#x3055;&#xFF1A;1-2 mm&#x3001;&#x5E45;&#xFF1A;65&#x304B;&#x3089;80&#x3BC;m&#xFF09;&#x306E;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7C89;&#x7815;&#x3057;&#x3066;&#x7A4F;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x9175;&#x7D20;&#x6D88;&#x5316;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;EC&#x7BA1;&#x304C;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x5185;&#x306B;&#x78BA;&#x4FDD;&#x3057;&#x3001;24&#xFF08;&#x5BA4;&#x6E29;&#xFF09;&#x3067;32&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;37&#x2103;&#x3092;&#x704C;&#x6D41;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x3068;ACh&#x306E;&#x30DC;&#x30FC;&#x30E9;&#x30B9;&#x6295;&#x4E0E;&#xFF08;200&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x301C;20&#x30CA;&#x30CE;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF09;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54; - &#x30D5;&#x30E9;-2&#x67D3;&#x6599;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3014;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;]&#x306F;&#x3001;&#xFF08;i&#xFF09;&#xFF08;380 nm&#x306E;&#x6CE2;&#x9577;&#x301C;340&#x3067;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x6BD4;&#xFF09;&#x3092;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x305F;&#x3002; EC&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x304C;24&#x3068;32&#x2103;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3001;K&#xFF08;d&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30E9;-2&#xFF08;24&#x6642;174 nM&#x306E;&#xB0;C&#x304A;&#x3088;&#x3073;32&#x3067;146 nM&#x306E;&#xB0;C&#xFF09;&#x3001;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;[Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;]&#xFF08;I&#xFF09;180&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x2103;&#xFF08;27&#xB1;4 34&#xB1;2nM&#x306E;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#xFF09;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x5FDC;&#x7B54;&#xFF08;20&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF09;&#x306F;24&#x2103;&#x301C;220 nm&#x304B;&#x3089;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x2103;&#x301C;&#x301C;500 nM&#x306E;32&#x3067;24&#x3068;32&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x5206;&#xB0;C&#xFF08;P &#x26;lt; 0.05&#xFF09;&#x3002;&#x96C4;&#x5BFE;&#x96CC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;EC&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; EC&#x7BA1;&#x306F;37&#xB0;C&#xFF08;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306E;&#x4EE3;&#x8868;&#x5024;&#xFF09;&#x3067;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;[Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;]&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x64A4;&#x56DE;&#x3057;&#x3001;&#x62BC;&#x51FA;&#x67D3;&#x6599;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#xFF08;i&#xFF09;&#x3092;15&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#x301C;30&#xFF05;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x9699;&#x9593;&#x6392;&#x9664;&#x3001;ECS&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;EC&#x7BA1;&#x30A4;&#x30CD;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EB;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x52D5;&#x8108;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;32&#x5BFE;24&#x3067;&#x7D04;2&#x500D;&#x3067;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#xB0;C&#x3001;37 EC&#x7BA1;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#xB0;C&#x306F;&#x3001;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x4F53;&#x6E29;&#x3067;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x3068;Ca&#xB2;&#x207A;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x52D5;&#x8108;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638; murine &#xD53C;&#xB4DC; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xACB0;&#xC815; &#xC5F0;&#xAD6C; (EC) &#xD29C;&#xBE0C;&#xB294; &#xAC13; &#xBCF5; &#xBD80; &#xADFC;&#xC721; &#xD53C;&#xB4DC; (5-9 &#xAC1C;&#xC6D4;, 25-35 g) &#xB0A8;&#xC131;&#xACFC; &#xC5EC;&#xC131;&#xC758; C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACA9;&#xB9AC;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; ([Ca(2+)](i)) &#xC751;&#xB2F5; muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC628;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; EC &#xD29C;&#xBE0C; (&#xAE38;&#xC774;: 1-2 m m, &#xD3ED;: 65-80 &mu; m) &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC18C;&#xD654; trituration &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xACE0; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB410;&#xB2E4;. &#xAC13; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; EC &#xD29C;&#xBE0C;&#xB294; &#xCC54;&#xBC84;&#xC5D0; &#xD655;&#xBCF4; &#xD558; &#xACE0; 24 (&#xC2E4;&#xB0B4; &#xC628;&#xB3C4;), 32 &#xB144; &#xB610;&#xB294; 37 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; superfused Fura 2 &#xC5FC;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; [ca(2+)](i)&#xB294; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xB41C; (340-380 nm &#xD30C;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xAD11;&#xC758;) &#xD734;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; bolus &#xD22C;&#xC5EC; &#xD558;&#xC758; &#xBE44;&#xC728; ACh (20 nmol 200 &mu;mol&#xC5D0;). EC &#xD29C;&#xBE0C;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; 24 &#xBC0F; 32 &deg; c.&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; fura 2 &#xACB0;&#xC815; Ca(2+) K(d) &#xAC12;&#xC744; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; (174 Nm&#xC5D0;&#xC11C; 24 &deg; C&#xC640; 146 Nm&#xC5D0;&#xC11C; 32 &deg; C), &#xD734;&#xC2DD; [Ca(2+)](i) 24 &#xBC0F; 32 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; 180 &#xBD84; &#xB3D9;&#xC548; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; (27 &plusmn; 4, 34 &plusmn; 2 nM, &#xAC01;&#xAC01;), &#xD53C;&#xD06C; &#xC751;&#xB2F5; Ach&#xC640; (20 &mu;mol) &sim;500 nM 32 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; 24 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; &sim;220 Nm&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; (P &lt; 0.05). &#xC751;&#xB2F5; ACh &#xB0A8;&#xC131; &#xB300; &#xC5EC;&#xC131; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; EC &#xD29C;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB54C; EC &#xD29C;&#xBE0C; &#xD734;&#xC2DD; [Ca(2+)](i) 15 &#xBD84; &#xC774;&#xB0B4; &sim;30% &#xC99D;&#xAC00; &#xBC0F; &#xCCA0;&#xD68C; &#xD558; &#xACE0; &#xC555;&#xCD9C; &#xC5FC;&#xB8CC;, &#xC774;&#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAC1C;&#xBCC4; ECs &#xC0AC;&#xC774; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAC04;&#xACA9; 37 &deg; c (&#xC77C;&#xBC18; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC628;&#xB3C4;) &#xC720;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; EC &#xD29C;&#xBE0C; Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638; murine &#xD53C;&#xB4DC; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC758; &#xAC13; &#xACA9;&#xB9AC; endothelium&#xC5D0; &#xD3C9;&#xAC00;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xACB0;&#xB860;. Ca(2+) &#xC751;&#xB2F5; &#xC57D; 24 &deg; C &#xB300; 32 &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; 37 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; EC &#xD29C;&#xBE0C;&#xC758; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; &#xCCB4;&#xC628;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xAC78;&#xB85C; &#xD558;&#xACA0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; &#xBC0F; Ca&sup2;&#x207A; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xAC13; &#xC808;&#xC5F0; murine &#xD53C;&#xB4DC; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xC5D0; &#xC628;&#xB3C4; &#xD6A8;&#xACFC;.

Para el estudio de Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en el endotelio de las arterias de alimentaci&#xF3;n de rat&#xF3;n, se determin&#xF3; la estabilidad in vitro de c&#xE9;lulas endoteliales (CE) tubos reci&#xE9;n aisladas de las arterias musculares abdominales de alimentaci&#xF3;n de machos y hembras C57BL / 6 ratones (5-9 meses, 25-35 g). Pusimos a prueba la hip&#xF3;tesis de que la intracelular de Ca (2 +) de concentraci&#xF3;n ([Ca (2 +)] (i)) las respuestas a la activaci&#xF3;n de los receptores muscar&#xED;nicos que aumentan con la temperatura. Intactos los tubos de la CE (longitud: 2.1 mm, ancho: 65 a 80 micras) se aislaron mediante digesti&#xF3;n enzim&#xE1;tica suave con la trituraci&#xF3;n para eliminar las c&#xE9;lulas musculares lisas. Un tubo CE reci&#xE9;n aislada fue asegurado en una c&#xE1;mara y superfused al 24 (temperatura ambiente), 32, &#xF3; 37 &#xB0; C. Usando fura-2 colorante, [Ca (2 +)] (i) se control&#xF3; (relaci&#xF3;n de fluorescencia a 340 - a 380-nm de longitud de onda) en reposo y en respuesta a las dosis de bolo de ACh (20 nmol a 200 micromoles). La integridad morfol&#xF3;gica de los tubos de la CE se ha conservado a 24 y 32 &#xB0; C. Basado en el Ca (2 +) K (d) los valores determinados para que fura-2 (174 nm a 24 &#xB0; C y 146 nm a 32 &#xB0; C), descansando [Ca (2 +)] (i) se mantuvo estable en 180 min a 24 y 32 &#xB0; C (27 &#xB1; 4 y 34 &#xB1; 2 nM, respectivamente), con respuestas de los picos a ACh (20 mmol) el aumento de ~ 220 nm a 24 &#xB0; C a ~ 500 nm a 32 &#xB0; C (p &#x26;lt; 0,05). No hubo diferencia en las respuestas a ACh entre los tubos de la CE de ratones machos frente hembra. Cuando los tubos de la CE se mantuvieron a 37 &#xB0; C (t&#xED;pico de la temperatura in vivo), en reposo [Ca (2 +)] (i) aumento en un 30% en los 15 minutos, y los huecos formados entre el individuo AE, ya que se retract&#xF3; y el tinte extruido, lo que impide estudio adicional. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que el Consejo tubos de habilitaci&#xF3;n de Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n para ser evaluados en el endotelio de las arterias reci&#xE9;n aislada de alimentaci&#xF3;n murinos. Mientras que el Ca (2 +) las respuestas se han mejorado en aproximadamente un doble a 32 frente a 24 &#xB0; C, la inestabilidad de los tubos de la CE a 37 &#xB0; C se opone a su estudio a la temperatura corporal normal.

Efectos de la temperatura en la integridad morfol&#xF3;gica y Ca &#xB2; &#x207A; de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en el reci&#xE9;n aislados Tubos murinos la arteria de alimentaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas endoteliales

&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x5C55;&#x88AB;&#x4FA7;&#x91CD;&#x4E8E;&#x6CBF;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x534F;&#x8C03;&#x8840;&#x6D41;&#x91CF;&#x63A7;&#x5236;&#x8840;&#x7BA1;&#x963B;&#x529B;&#x7F51;&#x7EDC;&#x4E2D;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;&#x53D1;&#x8D77;&#x7684;&#x627F;&#x5305;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x8840;&#x7BA1;&#x8212;&#x5F20;&#x529F;&#x80FD;&#x767B;&#x7684;&#x5C0F;&#x52A8;&#x8109;&#x5185;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x6297;&#x52A8;&#x8109;&#x4E0A;&#x6E38;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x589E;&#x52A0;&#x8840;&#x6D41;&#x91CF;&#x671F;&#x95F4;&#x884C;&#x4F7F;&#x3002;&#x5728;&#x963B;&#x529B;&#x8840;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1; microiontophoresis &#x6216;&#x80DE;&#x5185;&#x7535;&#x6D41;&#x6CE8;&#x5165;&#x542F;&#x52A8;&#x8FDB;&#x884C;&#x6E20;&#x9053;&#x5DEE;&#x8DDD;&#x4EA4;&#x754C;&#x5904; (GJCs) &#x6CBF;&#x8FDB;&#x884C;&#x8840;&#x7BA1;&#x8212;&#x5F20;&#x529F;&#x80FD; (CVD) &#x9020;&#x6210;&#x8840;&#x7BA1;&#x58C1;&#x7684;&#x6781;&#x5316;&#x3002;&#x5347;&#x5E8F;&#x8840;&#x7BA1;&#x8212;&#x5F20;&#x548C; CVD &#x88AB;&#x6D88;&#x9664;&#x5E72;&#x6270;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (EC)&#xFF0C;&#x6307;&#x5411;&#x5E38;&#x89C1;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x548C; EC &#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;&#x6240;&#x793A;&#x7535;&#x8026;&#x5408;&#x548C;&#x67D3;&#x6599;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5728;&#x80DE;&#x5185;&#x5F55;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5176;&#x7EB5;&#x5411;&#x65B9;&#x5411;&#x548C;&#x9C81;&#x68D2;&#x7684; GJCs &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F7F; ECs &#x5728; CVD &#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4F20;&#x5BFC;&#x5F00;&#x59CB;&#x540E;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#x96C6;&#x4E2D;&#x5728; CVD &#x662F;&#x7EAF;&#x7CB9;&#x7684;&#x88AB;&#x52A8;&#x8FD8;&#x662F;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7ECF;&#x548C;&#x7535;&#x6C14;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E0E;&#x91CD;&#x70B9;&#x653E;&#x5728;&#x901A;&#x8FC7; GJCs &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x8026;&#x5408;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F3A;&#x8C03;&#x4E86;&#x89E3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x52A8;&#x6001;&#x3001; EC &#x6781;&#x5316;&#x548C; CVD &#x4E4B;&#x95F4;&#x5173;&#x7CFB;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4ECE;&#x5B64;&#x7ACB; ECs &#x7ED3;&#x679C;&#x878D;&#x5165;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x66F4;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x4F34;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x75C5;&#x548C; cellular &#x95F4;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x90FD;&#x5DF2;&#x65E5;&#x76CA;&#x660E;&#x786E;&#x754C;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x800C;&#x9C9C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x77E5;&#x7684;&#x75C5;&#x56FD;&#x5BB6;&#x5982;&#x4F55;&#x6539;&#x53D8;&#x7ECF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x6CBF;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7535;&#x4F20;&#x5BFC;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5173;&#x7CFB;&#x5982;&#x4F55;&#x53D7;&#x548C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x662F;&#x7EE7;&#x7EED;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x9499;&#x548C;&#x7535;&#x6C14;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6CBF;&#x6297;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

This MiniReview is focused on the nature of intercellular signalling along the endothelium that helps to co-ordinate blood flow control in vascular resistance networks. Vasodilation initiated by contracting skeletal muscle ascends from arterioles within the tissue to encompass resistance arteries upstream and thereby increase blood flow during exercise. In resistance vessels, acetylcholine microiontophoresis or intracellular current injection initiates hyperpolarization that conducts through gap junction channels (GJCs) along the vessel wall resulting in conducted vasodilation (CVD). Both ascending vasodilation and CVD are eliminated with endothelial cell (EC) disruption, pointing to common signalling events and mutual dependence upon EC integrity. As demonstrated by electrical coupling and dye transfer during intracellular recording, their longitudinal orientation and robust expression of GJCs enable ECs to play a predominant role in CVD. Once conduction is initiated, a major interest centres on whether CVD is purely passive or involves additional 'active' signalling events. Here, we discuss components for Ca(2+) and electrical signalling with an emphasis on intercellular coupling through endothelial GJCs. We stress the importance of understanding relationships between intracellular Ca(2+) dynamics, EC hyperpolarization and CVD while integrating findings from isolated ECs into more complex interactions in vivo. Whereas endothelial dysfunction accompanies cardiovascular disease and the components of intra- and inter-cellular signalling are increasingly well defined, little is known of how Ca(2+) signalling and electrical conduction along microvascular endothelium are altered in diseased states. Thus, greater insight into how these relationships are governed and interact is a key goal for continued research efforts.

Calcium and electrical signalling along endothelium of the resistance vasculature.

Cette mini-revue est ax&#xE9;e sur la nature de signalisation intercellulaire long de l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium qui aide &#xE0; coordonner le contr&#xF4;le du flux sanguin dans les r&#xE9;seaux de la r&#xE9;sistance vasculaire. Vasodilatation initi&#xE9;e par contracter le muscle squelettique monte des art&#xE9;rioles au sein du tissu pour englober les art&#xE8;res de r&#xE9;sistance en amont et ainsi augmenter le flux sanguin pendant l&#x26;#39;exercice. Dans les vaisseaux de r&#xE9;sistance, l&#x26;#39;ac&#xE9;tylcholine ou microiontophor&#xE8;se intracellulaire d&#x26;#39;injection de courant d&#xE9;clenche une hyperpolarisation qui m&#xE8;ne par la voie des jonctions lacunaires (GJCs) le long de la paroi de la cuve entra&#xEE;nant une vasodilatation men&#xE9;e (CVD). Les deux vasodilatation croissant et les maladies cardiovasculaires sont &#xE9;limin&#xE9;s avec la cellule (CE) perturbation endoth&#xE9;liale, pointant vers les &#xE9;v&#xE9;nements de signalisation communs et la d&#xE9;pendance mutuelle sur l&#x26;#39;int&#xE9;grit&#xE9; du trait&#xE9; CE. Comme l&#x26;#39;a d&#xE9;montr&#xE9; par couplage &#xE9;lectrique et le transfert de teinture pendant l&#x26;#39;enregistrement intracellulaire, leur orientation longitudinale et d&#x26;#39;expression robuste de GJCs enable ECS &#xE0; jouer un r&#xF4;le pr&#xE9;dominant dans les MCV. Une fois que la conduction est lanc&#xE9;, quelques centres d&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t principaux &#xE0; savoir si CVD est purement passif ou implique suppl&#xE9;mentaires &#x26;#39;actives&#x26;#39; &#xE9;v&#xE9;nements de signalisation. Ici, nous discutons de composants pour le Ca (2 +) et de signalisation &#xE9;lectrique avec un accent sur le couplage intercellulaire par le biais GJCs endoth&#xE9;liales. Nous soulignons l&#x26;#39;importance de comprendre les relations entre concentration intracellulaire de Ca (2 +) la dynamique, CE hyperpolarisation et les maladies cardiovasculaires, tout en int&#xE9;grant les r&#xE9;sultats de ECs isol&#xE9; dans des interactions plus complexes in vivo. Alors que la dysfonction endoth&#xE9;liale accompagne les maladies cardiovasculaires et les composants de la signalisation intra-et inter-cellulaires sont de plus en plus bien d&#xE9;fini, on sait peu de la fa&#xE7;on dont Ca (2 +) de conduction &#xE9;lectrique le long de signalisation et de l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium microvasculaire sont modifi&#xE9;es dans les Etats malades. Ainsi, de mieux comprendre comment ces relations sont r&#xE9;gies et d&#x26;#39;interagir est un objectif cl&#xE9; pour les efforts de recherche continus.

Le calcium et la signalisation &#xE9;lectrique le long de l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium des vaisseaux sanguins de la R&#xE9;sistance

Diese MiniReview konzentriert sich auf die Art der interzellul&auml;re signalisieren entlang das Endothel, das hilft zu koordinieren-Blut-Flusssteuerung in Gef&auml;&szlig;widerstand Netzwerken. Vasodilatation, initiiert durch die Vergabe von Skelettmuskulatur steigt aus Arteriolen innerhalb des Gewebes Widerstand Arterien stromaufw&auml;rts und damit umfassen Steigerung Durchblutung w&auml;hrend des Trainings. Im Widerstand Schiffe initiiert Acetylcholin-Microiontophoresis oder intrazellul&auml;ren Stromeinspeisung Hyperpolarisation, die durch die L&uuml;cke Kreuzung Kan&auml;le (GJCs) entlang der Gef&auml;sswand, was zu durchgef&uuml;hrten Vasodilatation (CVD) durchf&uuml;hrt. Bei St&ouml;rung der Endothelzellen (EG), auf gemeinsame Signalgebung Ereignisse und gegenseitige Abh&auml;ngigkeit der EG Integrit&auml;t zeigen aufsteigende Vasodilatation und CVD entfallen. Wie elektrische Kopplung und Dye Transfer w&auml;hrend der intrazellul&auml;re Aufnahme gezeigt hat, aktivieren Sie ihre l&auml;ngs Ausrichtung und robuste Ausdruck der GJCs ECs eine vorherrschende Rolle in CVD. Sobald Leitverm&ouml;gen initiiert wird, konzentriert sich ein gro&szlig;es Interesse auf ob CVD ist rein passiv oder zus&auml;tzliche &#39;aktiv&#39; Signalgebung Ereignisse einbezieht. Hier diskutieren wir Komponenten f&uuml;r Ca(2+) und Elektrische Signalisierung mit Schwerpunkt interzellul&auml;re Kopplung durch endothelial GJCs. Wir betonen die Bedeutung des Verst&auml;ndnisses Beziehungen zwischen intrazellul&auml;re Ca(2+) Dynamik, EG Hyperpolarisation und CVD und Befunde von isolierten ECs in in-vivo komplexere Interaktionen zu integrieren. W&auml;hrend endothelialen Dysfunktion Herz-Kreislauf-Erkrankungen begleitet und die Komponenten Intra - und inter - cellular Signalling immer gut definiert sind, ist wenig bekannt, der wie Ca(2+) Signal- und elektrische Leitung entlang mikrovaskul&auml;re Endothel in Kranken Staaten ge&auml;ndert werden. Gr&ouml;&szlig;eren Einblick in wie diese Beziehungen unterliegen und interagieren deshalb ein wichtiges Ziel f&uuml;r weitere Forschungsanstrengungen.

Kalzium und Elektrische Signalisierung entlang Endothel des Widerstands-Gef&auml;&szlig;system.

Questo MiniReview &egrave; incentrato sulla natura della segnalazione intercellulare lungo l&#39;endotelio che contribuisce al controllo del flusso di sangue di coordinare in reti di resistenza vascolare. Vasodilatazione iniziata da contraenti muscolo scheletrico ascende dalle arteriole all&#39;interno del tessuto per comprendere le arterie di resistenza a monte e quindi aumento del flusso sanguigno durante l&#39;esercizio. Nei vasi di resistenza, acetilcolina microiontophoresis o iniezione corrente intracellulare avvia hyperpolarization che conduce attraverso canali di gap junction (GJCs) lungo la parete dei vasi con conseguente vasodilatazione condotto (CVD). Ascendente vasodilatazione e CVD sono eliminati con rottura delle cellule endoteliali (CE), che punta a eventi di segnalazione comuni e reciproca dipendenza integrit&agrave; CE. Come dimostrato dal trasferimento di accoppiamento e colorante elettrico durante la registrazione intracellulare, loro orientamento longitudinale e robusta espressione di GJCs consentono di ECs a giocare un ruolo predominante nella CVD. Una volta che la conduzione &egrave; avviato, un maggiore interesse centri CVD &egrave; puramente passiva o comporta ulteriori eventi di segnalazione &#39;attivi&#39;. Discutiamo qui, componenti per Ca(2+) e di segnalazione elettrica con un&#39;enfasi sull&#39;accoppiamento intercellulare attraverso GJCs endoteliale. Sottolineiamo l&#39;importanza delle relazioni di comprensione tra intracellulare Ca(2+) dinamiche hyperpolarization CE e CVD integrando scoperte da ECs isolato in pi&ugrave; complesse interazioni in vivo. Considerando che la disfunzione endoteliale accompagna le malattie cardiovascolari e componenti di segnalamento intra - e inter - cellular sono sempre ben definiti, si sa poco di come Ca(2+) di segnalazione e di conduzione elettrica lungo endotelio microvascolare sono alterate negli Stati malati. Cos&igrave;, una maggiore comprensione in come questi rapporti sono disciplinati e interagiscono &egrave; un obiettivo chiave per gli sforzi di ricerca continua.

Calcio e segnalazione elettrica lungo l&#39;endotelio dei vasi resistenza.

&#x3053;&#x306E;&#x30DF;&#x30CB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x62B5;&#x6297;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3067;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C8;&#x8840;&#x6D41;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8840;&#x7BA1;&#x306F;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x4E2D;&#x306E;&#x8840;&#x6D41;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x4E0A;&#x6D41;&#x5074;&#x3068;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x52D5;&#x8108;&#x3092;&#x5305;&#x542B;&#x3059;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#x306E;&#x52D5;&#x8108;&#x304B;&#x3089;&#x4E0A;&#x6607;&#x3002;&#x62B5;&#x6297;&#x8840;&#x7BA1;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;microiontophoresis&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x6CE8;&#x5165;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x8840;&#x7BA1;&#x62E1;&#x5F35;&#xFF08;CVD&#xFF09;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x58C1;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B8;&#x30E3;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x200B;&#x200B;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF08;GJCs&#xFF09;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x884C;&#x3063;&#x3066;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6607;&#x9806;&#x8840;&#x7BA1;&#x62E1;&#x5F35;&#x304A;&#x3088;&#x3073;CVD&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;EC&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3092;&#x6307;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;EC&#xFF09;&#x306E;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3067;&#x9664;&#x53BB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8A18;&#x9332;&#x4E2D;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x8272;&#x7D20;&#x8EE2;&#x5199;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9577;&#x624B;&#x65B9;&#x5411;&#x3068;GJCs&#x30A4;&#x30CD;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EB;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;CVD&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;EC&#x306E;&#x3002;&#x4E00;&#x5EA6;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x306F;&#x3001;CVD&#x306F;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306B;&#x53D7;&#x52D5;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E; 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&#xC774; MiniReview &#xD608;&#xAD00; &#xC800;&#xD56D; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC5D0; &#xACF5;&#xB3D9; &#xD608;&#xC561; &#xD750;&#xB984; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; endothelium &#xB530;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD94;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5F7;&#xAC8C; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721;&#xC744; &#xACC4;&#xC57D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xC791; &#xB41C; &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC99D;&#xAC00; &#xD608;&#xC561; &#xD750;&#xB984; arterioles &#xC0C1;&#xB958;&#xC640; &#xADF8;&#xB85C; &#xC778;&#xD558;&#xC5EC; &#xC800;&#xD56D; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC744; &#xD3EC;&#xAD04; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xC9C1; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC62C;&#xB77C;&#xAC00; &#xC694;. &#xC800;&#xD56D; &#xD608;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; microiontophoresis &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD604;&#xC7AC; &#xBD84;&#xC0AC; hyperpolarization &#xC2E4;&#xC2DC; &#xC5F7;&#xAC8C; (CVD)&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xD608;&#xAD00; &#xBCBD;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xAC2D; &#xC815;&#xC158; &#xCC44;&#xB110; (GJCs)&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB450; &#xC624;&#xB984;&#xCC28;&#xC21C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F7;&#xAC8C; &#xBC0F; &#xC99D; &#xCC29; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (EC) &#xC911;&#xB2E8; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xD638; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBC0F; EC &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC758;&#xC874;&#xC744; &#xAC00;&#xB9AC;&#xD0A4;&#xB294; &#xC81C;&#xAC70;. &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB179;&#xC74C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC804;&#xAE30; &#xCEE4;&#xD50C;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xB4EF;&#xC774; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC885; &#xBC29;&#xD5A5; &#xBC0F; Gjcs&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC2DD; ECs CVD&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xB3C4; &#xC2DC;&#xC791; &#xB418; &#xBA74; &#xC8FC;&#xC694; &#xAD00;&#xC2EC; &#xC99D; &#xCC29; &#xC21C;&#xC804;&#xD788; &#xC218; &#xB3D9;&#xC801; &#xB610;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xCD94;&#xAC00; &#39;&#xD65C;&#xC131;&#39; &#xD3EC;&#xD568; &#xC5EC;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC13C;&#xD130;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; Ca(2+) &#xBC0F; &#xB0B4; &#xD53C; GJCs &#xD1B5;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xACB0;&#xD569;&#xC5D0; &#xC911;&#xC810;&#xC744; &#xB450;&#xACE0; &#xC804;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xB17C;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB354; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; Ecs&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xC5ED;&#xD559;, EC hyperpolarization CVD &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC774;&#xD574; &#xAD00;&#xACC4;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;. &#xB0B4; &#xD53C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560; &#xB3D9;&#xBC18; &#xC2EC;&#xD608; &#xAD00; &#xC9C8;&#xD658; &#xB0B4;&#xACFC; &#xB610;&#xB294; cellular &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xC810;&#xC810; &#xB354; &#xC798; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xBC18;&#xBA74;&#xC5D0;, &#xC791;&#xC740; &#xBCD1;&#xC5D0; &#xAC78;&#xB9B0; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4; microvascular endothelium &#xB530;&#xB77C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xACC4;&#xB294; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB354; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB178;&#xB825;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD575;&#xC2EC; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCE7C;&#xC298;&#xACFC; &#xC800;&#xD56D; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xC804;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638;.

Este minirevisi&#xF3;n se centra en la naturaleza de se&#xF1;alizaci&#xF3;n intercelular a lo largo del endotelio que ayuda a coordinar el control del flujo sangu&#xED;neo en las redes de la resistencia vascular. La vasodilataci&#xF3;n iniciado por el m&#xFA;sculo esquel&#xE9;tico asciende de las arteriolas en el tejido para incluir las arterias de resistencia ascendente y por lo tanto aumentar el flujo sangu&#xED;neo durante el ejercicio. En los vasos de resistencia, los microiontophoresis acetilcolina o de inyecci&#xF3;n de corriente intracelular inicia hiperpolarizaci&#xF3;n que lleva a cabo a trav&#xE9;s de canales de derivaci&#xF3;n brecha (GJCs) a lo largo de la pared del vaso que resulta en vasodilataci&#xF3;n llev&#xF3; a cabo (ECV). Tanto la vasodilataci&#xF3;n ascendente y las enfermedades cardiovasculares son eliminados con las c&#xE9;lulas endoteliales (CE) la interrupci&#xF3;n, que apunta a los eventos de se&#xF1;alizaci&#xF3;n comunes y la dependencia mutua en la integridad del Tratado CE. Como se ha demostrado por el acoplamiento el&#xE9;ctrico y la transferencia de tintes durante el registro intracelular, su orientaci&#xF3;n longitudinal y s&#xF3;lida expresi&#xF3;n de AE &#x200B;&#x200B;GJCs habilitaci&#xF3;n para jugar un papel predominante en las enfermedades cardiovasculares. Una vez que la conducci&#xF3;n se inicia, algunos centros de inter&#xE9;s m&#xE1;s importantes acerca de si las enfermedades cardiovasculares es meramente pasiva o implica adicionales de los activos de los eventos de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. En este caso, hablamos de los componentes de Ca (2 +) y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n el&#xE9;ctrica con &#xE9;nfasis en el acoplamiento intercelular a trav&#xE9;s GJCs endoteliales. Hacemos hincapi&#xE9; en la importancia de entender las relaciones entre intracelular de Ca (2 +) la din&#xE1;mica, la hiperpolarizaci&#xF3;n CE y las enfermedades cardiovasculares, mientras que la integraci&#xF3;n de los hallazgos de EC aisladas de las interacciones m&#xE1;s complejas in vivo. Considerando que la disfunci&#xF3;n endotelial acompa&#xF1;a a la enfermedad cardiovascular y los componentes de se&#xF1;alizaci&#xF3;n intra-e inter-celular son cada vez m&#xE1;s definida, se sabe poco de c&#xF3;mo Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n y de conducci&#xF3;n el&#xE9;ctrica a lo largo del endotelio microvascular est&#xE1;n alterados en estados de enfermedad. Por lo tanto, una mayor comprensi&#xF3;n de c&#xF3;mo estas relaciones se rigen e interactuar es un objetivo clave para los esfuerzos continuados de investigaci&#xF3;n.

El calcio y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n el&#xE9;ctrica a lo largo del endotelio de la vasculatura Resistencia

&#x80CC;&#x666F;&#x548C;&#x76EE;&#x7684;&#xFF1A; &#x963B;&#x529B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBF;&#x5BFC;&#x7535;&#x5C1A;&#x672A;&#x786E;&#x5B9A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#xFF0C;&#x5468;&#x56F4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6216;&#x8840;&#x6DB2;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x68C0;&#x9A8C;&#xFF1A; (1) &#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x4F20;&#x5BFC;&#x7684;&#x7535;&#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x6E05;&#x5355;&#x4E2D;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (EC) &#x7BA1; &#xFF1B;(2) &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x5DEE;&#x8DDD;&#x4EA4;&#x754C;&#x5904;&#x9891;&#x9053; (GJCs) &#x6709;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6DF7;&#x6DC6; EC &#x7535;&#x6C14;&#x548C;&#x7ECF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3002;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A; &#x5B8C;&#x597D;&#x7EDF;&#x7BA1;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x6765;&#x81EA;&#x9972;&#x6599;&#x7684; C57BL/6 &#x5C0F;&#x9F20;&#x52A8;&#x8109;&#x7684;&#x8179;&#x90E8;&#x808C;&#x8089;&#x3002;&#x95F4;&#x63A5; (&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;) &#x548C; (NS309) &#x76F4;&#x63A5;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x548C;&#x5C0F;-&#x7535;&#x5BFC;&#x7ECF;&#x53D1;&#x8D77;&#x4E86;&#x6781;&#x5316;-&#x6FC0;&#x6D3B; K(+) &#x6E20;&#x9053; (IK(Ca) /SK(Ca))&#x3002;&#x80DE;&#x5185;&#x7535;&#x6D41;&#x6CE8;&#x5165;&#x8FDC;&#x7A0B;&#x819C;&#x6F5C;&#x5728; &#xFF08;V(m)&#xFF09; &#x54CD;&#x5E94;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7535;&#x4F20;&#x5BFC;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x5E38;&#x6570; (&lambda;)&#x3002;&#x67D3;&#x6599;&#x8026;&#x5408;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x540E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7898;&#x5316;&#x4E19;&#x952D;&#x3002;&#x80DE;&#x7ECF;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x662F;&#x4F7F;&#x7528; Fura 2 &#x5149;&#x5EA6;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x73C0; (CBX) &#x6216; &beta;-&#x7518;&#x8349;&#x6B21;&#x9178; (&beta;GA) &#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8C03;&#x67E5; GJCs.&#x4E3B;&#x8981;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF1A; &#x7A33;&#x6001; ECs V(m) &#x662F; &sim; 25 mV&#x3002;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x548C; NS309 &#x8D85;&#x5206;&#x522B;&#x7531; &sim; 40 mV &#x548C; &sim; 60 mV&#xFF0C;&#x6781;&#x5316; ECs&#x3002;&#x8150;&#x70C2;&#x7684;&#x7535;&#x4F20;&#x5BFC; monoexponentially &#x4E0E;&#x8DDD;&#x79BB; &#xFF08;&lambda;&sim;1.4 &#x6BEB;&#x7C73;&#xFF09;&#x3002;&#x7898;&#x5316;&#x4E19;&#x952D;&#x6CE8;&#x5165;&#x4E00;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x8513;&#x5EF6;&#x5230;&#x5468;&#x56F4; ECs&#x3002;CBX &#x6216; &beta;GA &#x53EF;&#x9006;&#x6291;&#x5236;&#x67D3;&#x6599;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3001; &#x5BFC;&#x7535;&#x548C; EC &#x6781;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4EE3;&#x7406;&#x9AD8;&#x67B6;&#x4F11;&#x606F;&#x7ECF;&#x867D;&#x7136; &beta;GA &#x6291;&#x5236;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x7684;&#x56DE;&#x5E94;&#x3002;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x548C;&#x6240;&#x6D89;&#x95EE;&#x9898;&#xFF1A; &#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x662F; well-coupled &#x5F7C;&#x6B64;&#x7EDF;&#x7BA1;&#x5185;&#x3002;&#x4E0E;&#x7518;&#x8349;&#x6B21;&#x9178;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x6291;&#x5236; GJCs &#x4E0E; IK(Ca) /SK(Ca) &#x4E0D;&#x8BBA;&#x7ECF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x907F;&#x514D;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5236;&#x5242;&#x5728;&#x89E3;&#x51B3;&#x6CBF;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7535;&#x4F20;&#x5BFC;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8D85;&#x6781;&#x5316;&#x5931;&#x53BB;&#x543B;&#x5408;&#x3002;

&#x6CBF;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7BA1;&#x4ECE;&#x9F20;&#x6807;&#x7684;&#x7535;&#x4F20;&#x5BFC;&#x9972;&#x6599;&#x52A8;&#x8109;&#xFF1A; &#x6DF7;&#x6742;&#x7684;&#x7518;&#x8349;&#x6B21;&#x9178;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;

Background and purpose:â€ƒ Electrical conduction along endothelium of resistance vessels has not been determined independent from the influence of smooth muscle, surrounding tissue or blood. Two interrelated hypotheses were tested: (1) Intercellular conduction of electrical signals is manifest in endothelial cell (EC) tubes; (2) Inhibitors of gap junction channels (GJCs) have confounding actions on EC electrical and Ca(2+) signaling. Experimental approach:â€ƒ Intact EC tubes were isolated from abdominal muscle feed arteries of C57BL/6 mice. Hyperpolarization was initiated with indirect (acetylcholine) and direct (NS309) stimulation of intermediate- and small-conductance Ca(2+) -activated K(+) channels (IK(Ca) /SK(Ca) ). Remote membrane potential (V(m) ) responses to intracellular current injection defined the length constant (Î») for electrical conduction. Dye coupling was evaluated following intracellular microinjection of propidium iodide. Intracellular Ca(2+) dynamics were determined using Fura-2 photometry. Carbenoxolone (CBX) or Î²-glycyrrhetinic acid (Î²GA) were used to investigate the role of GJCs. Key results:â€ƒ Steady-state V(m) of ECs was âˆ¼-25 mV. Acetylcholine and NS309 hyperpolarized ECs by âˆ¼-40 mV and âˆ¼-60 mV, respectively. Electrical conduction decayed monoexponentially with distance (Î»âˆ¼1.4 mm). Propidium iodide injected into one EC spread into surrounding ECs. CBX or Î²GA inhibited dye transfer, electrical conduction and EC hyperpolarization reversibly. Both agents elevated resting Ca(2+) while Î²GA inhibited responses to ACh. Conclusions and implications:â€ƒ Individual cells are well-coupled to each other within EC tubes. Inhibiting GJCs with glycyrrhetinic acid derivatives coincides with loss of hyperpolarization mediated by IK(Ca) /SK(Ca) irrespective of Ca(2+) signaling, obviating use of these agents in resolving key determinants of electrical conduction along the endothelium.

Electrical conduction along endothelial cell tubes from mouse feed arteries: Confounding actions of glycyrrhetinic acid derivatives.

Contexte et objectif: La conduction &#xE9;lectrique le long endoth&#xE9;lium des vaisseaux de r&#xE9;sistance n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;e ind&#xE9;pendante de l&#x26;#39;influence du muscle lisse, le tissu environnant ou de sang. Deux hypoth&#xE8;ses ont &#xE9;t&#xE9; test&#xE9;es interd&#xE9;pendantes: (1) de conduction intercellulaire de signaux &#xE9;lectriques est manifeste dans la cellule endoth&#xE9;liale (CE) des tubes; (2) Les inhibiteurs de canaux des jonctions lacunaires (GJCs) ont des actions de confusion sur CE &#xE9;lectrique et Ca (2 +) de signalisation. Approche exp&#xE9;rimentale: Intact tubes EC ont &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;s &#xE0; partir abdominales art&#xE8;res d&#x26;#39;alimentation musculaires de souris C57BL / 6. Hyperpolarisation a &#xE9;t&#xE9; lanc&#xE9; avec indirecte (l&#x26;#39;ac&#xE9;tylcholine) et direct (NS309) la stimulation de l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire et petit-conductance Ca (2 +) activ&#xE9; par K (+) des canaux (IK (Ca) / SK (Ca)). Le potentiel de membrane &#xE0; distance (V m)) des r&#xE9;ponses &#xE0; intracellulaire d&#x26;#39;injection de courant continu selon la constante de longueur (&#x3BB;) pour la conduction &#xE9;lectrique. Couplage Dye a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;e apr&#xE8;s injection intracellulaire de l&#x26;#39;iodure de propidium. Intracellulaire de Ca (2 +) ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;s en utilisant la dynamique Fura-2 photom&#xE9;trie. Carb&#xE9;noxolone (CBX) ou &#x3B2;-glycyrrh&#xE9;tinique (&#x3B2;GA) ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour &#xE9;tudier le r&#xF4;le des GJCs. Principaux r&#xE9;sultats: L&#x26;#39;&#xE9;tat d&#x26;#39;&#xE9;quilibre V (m) des contraceptifs d&#x26;#39;urgence &#xE9;tait d&#x26;#39;environ -25 mV. L&#x26;#39;ac&#xE9;tylcholine et NS309 hyperpolaris&#xE9; ECS par ~ ~ -40 mV et -60 mV, respectivement. La conduction &#xE9;lectrique pourri monoexponentielle avec la distance (~ 1.4 mm lambda). L&#x26;#39;iodure de propidium inject&#xE9; dans une planche CE en entourant les CE. CBX ou &#x3B2;GA inhib&#xE9;e par transfert de colorant, la conduction &#xE9;lectrique et hyperpolarisation CE r&#xE9;versible. Les deux agents de repos &#xE9;lev&#xE9;e Ca (2 +) tout en &#x3B2;GA a inhib&#xE9; les r&#xE9;ponses &#xE0; l&#x26;#39;ACh. Conclusions et implications: Les cellules individuelles sont bien coupl&#xE9;s les uns aux autres dans des tubes de la CE. GJCs inhibitrice des d&#xE9;riv&#xE9;s d&#x26;#39;acide glycyrrh&#xE9;tinique co&#xEF;ncide avec la perte de m&#xE9;diation hyperpolarisation par IK (Ca) / SK (Ca), ind&#xE9;pendamment de Ca (2 +) de signalisation, ce qui &#xE9;vite l&#x26;#39;utilisation de ces agents dans la r&#xE9;solution des principaux d&#xE9;terminants de la conduction &#xE9;lectrique le long de l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium.

Conduction &#xE9;lectrique le long des tubes de cellules endoth&#xE9;liales des art&#xE8;res d&#x26;#39;alimentation de la souris: Actions de confusion de d&#xE9;riv&#xE9;s de l&#x26;#39;acide glycyrrh&#xE9;tinique

Hintergrund und Ziel: elektrische Leitverm&ouml;gen entlang Endothel Widerstand Schiffe wurde nicht unabh&auml;ngig vom Einfluss der glatten Muskulatur, umgebenden Gewebe oder Blut bestimmt. Zwei zusammenh&auml;ngende Hypothesen wurden getestet: (1) interzellul&auml;re Leitverm&ouml;gen der elektrischen Signale zeigt sich in Endothelzellen (EG) Rohre; (2) Inhibitoren der L&uuml;cke Kreuzung Kan&auml;le (GJCs) haben verwirrende Aktionen im EG elektrische und Ca(2+) zu signalisieren. Experimenteller Ansatz: intakt EG Rohre wurden aus Bauchmuskel feed Arterien von C57BL/6 M&auml;usen isoliert. Hyperpolarisation wurde eingeleitet, mit indirekten (Acetylcholin) und direkte (NS309) Stimulation des zwischen- und klein-Leitwert-Ca(2+)-aktiviert K(+) Kan&auml;le (IK(Ca) /SK(Ca)). Entfernte Membran potenzielle (V(m)) Antworten zu intrazellul&auml;ren Stromeinspeisung definiert die L&auml;nge-Konstante (&lambda;) f&uuml;r elektrische Leitung. Farbstoff-Kupplung wurde nach intrazellul&auml;re Microinjection der Propidium Jodid ausgewertet. Intrazellul&auml;re Ca(2+) Dynamik wurden mit Fura-2 Photometrie bestimmt. Carbenoxolone (CBX) oder &beta;-Glycyrrhetinic S&auml;ure (&beta;GA) wurden verwendet, um die Rolle der GJCs. Key Ergebnisse untersuchen: station&auml;re V(m) von ECs war &sim;-25 mV. Acetylcholin und NS309 hyperpolarized ECs &sim;-40 mV und &sim;-60 mV. Elektrisches Leitverm&ouml;gen verfiel Monoexponentially mit Abstand (&lambda;&sim;1.4 mm). Propidium Jodid in einem EG Ausbreitung in umliegenden ECs injiziert. CBX oder &beta;GA gehemmt Farb&uuml;bertragungs, elektrisches Leitverm&ouml;gen und EG Hyperpolarisation umkehrbar. Beide Agenten erhoben Ca(2+) ruhen, w&auml;hrend &beta;GA Antworten zu ACh gehemmt. Schlussfolgerungen und Implikationen: einzelne Zellen sind well-coupled miteinander innerhalb der EG-R&ouml;hren. Hemmung von GJCs mit Glycyrrhetinic S&auml;ure Derivate f&auml;llt mit Verlust der Hyperpolarisation von IK(Ca) /SK(Ca) unabh&auml;ngig von Ca(2+) signalisieren, Beseitigung Verwendung dieser Wirkstoffe bei der L&ouml;sung der wichtigsten Determinants der elektrischen Leitung entlang das Endothel vermittelt.

Elektrische Leitung entlang endothelial Zellen Rohre aus Maus feed Arterien: Verluste zuf&uuml;gte Aktionen Glycyrrhetinic S&auml;ure Derivate.

Priorit&agrave; bassa e scopo: conduzione elettrica lungo l&#39;endotelio dei vasi di resistenza non &egrave; stata determinata indipendente dall&#39;influenza del muscolo liscio, che circonda il tessuto o sangue. Sono state testate due ipotesi interrelate: (1) intercellulari conduzione dei segnali elettrici si manifesta nei tubi delle cellule endoteliali (CE); (2) Inibitori dei canali di gap junction (GJCs) hanno azioni confondenti CE elettrico e Ca(2+) di segnalazione. Approccio sperimentale: CE intatto tubi sono stati isolati dal muscolo addominale che alimentano le arterie dei topi C57BL/6. Hyperpolarization &egrave; stato avviato con indiretta (acetilcolina) e stimolazione diretta (NS309) di intermedio - e piccolo-conduttanza Ca(2+)-attivato canali K(+) (IK(Ca) /SK(Ca)). Le potenziali risposte (V(m)) membrana remota per iniezione di corrente intracellulare definita la costante di lunghezza (&lambda;) per conduzione elettrica. Accoppiamento di tintura &egrave; stata valutata seguendo la microiniezione intracellulare di ioduro di propidium. Intracellulare Ca(2+) dinamiche sono stati determinati mediante fotometria Fura-2. Carbenoxolone (CBX) o &beta;-glicirretico acido (&beta;GA) sono stati utilizzati per indagare il ruolo dei risultati GJCs. Key: Steady-state V(m) di ECs era &sim;-25 mV. Acetilcolina e NS309 hyperpolarized ECs da &sim;-40 mV e &sim;-60 mV, rispettivamente. Conduzione elettrica decaduto monoexponentially con la distanza (mm &lambda;&sim;1.4). Ioduro di propidium iniettato in uno CE si diffuse in ECs circostanti. CBX o &beta;GA inibisce reversibilmente dye transfer, conduzione elettrica e hyperpolarization CE. Entrambi gli agenti elevato a riposo Ca(2+) mentre &beta;GA inibite le risposte all&#39;ACh. Conclusioni e implicazioni: le singole celle sono well-coupled a vicenda all&#39;interno di tubi di CE. Inibizione GJCs con derivati dell&#39;acido glicirretico coincide con la perdita di hyperpolarization mediata da IK(Ca) /SK(Ca) a prescindere dal Ca(2+) segnalazione, affezioni uso di questi agenti nel risolvere determinanti della conduzione elettrica lungo l&#39;endotelio.

Conduzione elettrica lungo i tubi delle cellule endoteliali da mouse feed arterie: confondimento azioni di derivati dell&#39;acido glicirretico.

&#x80CC;&#x666F;&#x3068;&#x76EE;&#x7684;&#xFF1A;&#x62B5;&#x6297;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x3084;&#x8840;&#x6DB2;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x56F2;&#x3080;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304B;&#x3089;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002; 2&#x3064;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#xFF1A;&#xFF08;1&#xFF09;&#x96FB;&#x6C17;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x306F;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;EC&#xFF09;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x5185;&#x306E;&#x30DE;&#x30CB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#xFF08;2&#xFF09;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B8;&#x30E3;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x200B;&#x200B;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#xFF08;GJCs&#xFF09;&#x306F;&#x3001;EC&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x3068;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4EA4;&#x7D61;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#xFF1A;&#x7121;&#x50B7;EC&#x7BA1;&#x306F;C57BL / 6&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8179;&#x90E8;&#x7B4B;&#x8089;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x52D5;&#x8108;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#xFF08;+&#xFF09;&#x306F;&#x4E2D;&#x9593;&#x3001;&#x5C0F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;K&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF08;IK&#xFF08;Ca&#xFF09;&#x3068;/ SK&#xFF08;CA&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#xFF08;NS309&#xFF09;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#xFF08;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF09;&#x3068;&#x76F4;&#x63A5;&#x523A;&#x6FC0;&#x3067;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C8;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#xFF08;V&#xFF08;M&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x6CE8;&#x5165;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#xFF08;&#x3BB;&#xFF09;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x3002;&#x8272;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x30E8;&#x30A6;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5F8C;&#x306B;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30E9;-2&#x6E2C;&#x5149;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D9;&#x30CE;&#x30AD;&#x30BD;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;CBX&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3B2;-&#x30B0;&#x30EA;&#x30C1;&#x30EB;&#x30EC;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;&#x3B2;GA&#xFF09;&#x306F;GJCs&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x4E3B;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#xFF1A;ECS&#x306E;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;V&#xFF08;m&#xFF09;&#x306F;&#x301C;-25 mV&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x301C;-40 mV&#x3068;&#x301C;-60 mV&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x3068;NS309 EC&#x306E;&#x3002;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x306F;&#x3001;&#x8DDD;&#x96E2;&#xFF08;&#x3BB;&#x301C;1.4 mm&#xFF09;&#x3067;monoexponentially&#x6E1B;&#x8870;&#x3002;&#x30E8;&#x30A6;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306F;EC&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5DFB;&#x304F;&#x306B;1&#x3064;&#x306E;EC&#x666E;&#x53CA;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3002; CBX&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3B2;GA&#x306F;&#x53EF;&#x9006;&#x79FB;&#x67D3;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;EC&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#x3B2;GA&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3092;&#x4F11;&#x3093;&#x3067;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x542B;&#x610F;&#xFF1A;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;EC&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x5185;&#x306B;&#x304A;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x3088;&#x304F;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B0;&#x30EA;&#x30C1;&#x30EB;&#x30EC;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x3068;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;GJCs&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x85AC;&#x5264;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x672A;&#x7136;&#x306B;&#x9632;&#x3050;&#x3001;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x304F;&#x3001;IK&#xFF08;Ca&#xFF09;&#x306E;/ SK&#xFF08;CA&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x52D5;&#x8108;&#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7BA1;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#xFF1A;&#x30B0;&#x30EA;&#x30C1;&#x30EB;&#x30EC;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306E;&#x4EA4;&#x7D61;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xBC30;&#xACBD; &#xBC0F; &#xBAA9;&#xC801;: &#xC800;&#xD56D; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4; &#xC870;&#xC9C1;&#xC774; &#xB098; &#xD608;&#xC561;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAC00;&#xC124; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;: &#xC804;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638; (1) &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xB3C4; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (EC) &#xD29C;&#xBE0C;; (&#xAC2D; &#xC815;&#xC158; &#xCC44;&#xB110; (GJCs)&#xC758; &#xC800; &#xD574;&#xC81C; 2) &#xC804;&#xAE30; EC &#xBC0F; Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD63C;&#xB780; &#xC791;&#xC5C5; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC29;&#xBC95;: &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; EC &#xD29C;&#xBE0C; &#xBCF5; &#xBD80; &#xADFC;&#xC721; &#xD53C;&#xB4DC; C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Hyperpolarization &#xAC04;&#xC811; (&#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0;)&#xC640; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; (NS309) &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xC911;&#xAC04;-&#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC18C;&#xD615;-&#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; Ca(2+) &#xC2DC;&#xC791; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;-&#xD65C;&#xC131;&#xD654; K(+) &#xCC44;&#xB110; (IK(Ca) /SK(Ca)). &#xC6D0;&#xACA9; &#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD604;&#xC7AC; &#xBD84;&#xC0AC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; (V(m)) &#xC751;&#xB2F5; &#xAE38;&#xC774; &#xC0C1;&#xC218; (&lambda;) &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xC758;. &#xC5FC;&#xB8CC; &#xCEE4;&#xD50C;&#xB9C1; propidium &#xC694;&#xC624;&#xB4DC; &#xD654;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; microinjection &#xB2E4;&#xC74C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xC5ED;&#xD559; Fura 2 &#xAD11;&#xB3C4; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. Carbenoxolone (CBX) &#xB610;&#xB294; &beta;-glycyrrhetinic &#xC0B0; (&beta;GA) GJCs. &#xD0A4; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;: &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC; ECs v(m)&#xB294; &sim; 25 mV. &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0;&#xACFC; NS309 &#xAC01;&#xAC01; &sim; 40 mV &#xBC0F; &sim; 60 mV, ECs hyperpolarized. &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4; &#xBD80;&#xC2DD; &#xAC70;&#xB9AC; (&lambda;&sim;1.4 m m) monoexponentially. Propidium &#xC694;&#xC624;&#xB4DC; &#xD654; &#xC8FC;&#xBCC0; Ecs&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0; &#xD55C; EC&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC785;. CBX &#xB610;&#xB294; &beta;GA &#xC800;&#xD574; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xC804;&#xC1A1;, &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4; &#xBC0F; EC hyperpolarization &#xC5ED;. &#xB450; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB450; &#xB192;&#xC740; Ca(2+) &beta;GA &#xC751;&#xB2F5; ACh &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD734;&#xC2DD;. &#xACB0;&#xB860; &#xBC0F; &#xC758;&#xBBF8;: &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC140;&#xC740; EC &#xD29C;&#xBE0C; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xAC8C; well-coupled. Glycyrrhetinic &#xC0B0; &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4;&#xC640; GJCs &#xC5B5;&#xC81C; &#xC190;&#xC2E4; IK(Ca) /SK(Ca) Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638;, obviating endothelium &#xB530;&#xB77C; &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC911;&#xC7AC; hyperpolarization &#xC77C;&#xCE58; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4; &#xD53C;&#xB4DC; &#xB3D9;&#xB9E5;: glycyrrhetinic &#xC0B0; &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4;&#xC758; &#xD63C;&#xB780; &#xD568;&#xC744; &#xC8FC; &#xC8E0;.

Antecedentes y finalidad de la conducci&#xF3;n el&#xE9;ctrica a lo largo de endotelio de los vasos de resistencia no ha sido determinada independiente de la influencia de m&#xFA;sculo liso, el tejido circundante o de sangre. Dos hip&#xF3;tesis relacionadas entre s&#xED; se pusieron a prueba: (1) la conducci&#xF3;n intercelular de las se&#xF1;ales el&#xE9;ctricas se manifiesta en las c&#xE9;lulas endoteliales (CE) tubos, (2) Los inhibidores de los canales de derivaci&#xF3;n brecha (GJCs) tienen acciones de confusi&#xF3;n en CE el&#xE9;ctrica y Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Enfoque experimental: intactos los tubos de la CE fueron aisladas de las arterias musculares abdominales de alimentaci&#xF3;n de ratones C57BL / 6. Hiperpolarizaci&#xF3;n se inici&#xF3; con la indirecta (acetilcolina) y directa (NS309) la estimulaci&#xF3;n de la media y peque&#xF1;a conductancia Ca (2 +) activada por K (+) canales (IK (Ca) / SK (CA)). Potencial de membrana a distancia (V (m)) las respuestas a intracelular de inyecci&#xF3;n de corriente se define la constante de longitud (&#x3BB;) para la conducci&#xF3;n el&#xE9;ctrica. Dye acoplamiento se realiz&#xF3; tras la microinyecci&#xF3;n intracelular de yoduro de propidio. Intracelular de Ca (2 +) se determinaron utilizando la din&#xE1;mica de Fura-2 fotometr&#xED;a. Carbenoxolona (CBX) o &#x3B2;-glycyrrhetinic &#xE1;cido (&#x3B2;GA) fueron utilizados para investigar el papel de GJCs. Principales resultados: El estado de equilibrio V (m) de EC fue de ~ -25 mV. La acetilcolina y la NS309 hiperpolarizado EC by ~ -40 mV y -60 mV ~, respectivamente. La conducci&#xF3;n el&#xE9;ctrica decay&#xF3; monoexponentially con la distancia (lambda ~ 1.4 mm). Yoduro de propidio se inyecta en una extensi&#xF3;n que rodea la CE en EC. CBX o &#x3B2;GA inhibe la transferencia de tintes, la conducci&#xF3;n el&#xE9;ctrica e hiperpolarizaci&#xF3;n CE reversible. Ambos agentes elevado reposo Ca (2 +) mientras que &#x3B2;GA inhibe las respuestas a la ACh. Conclusiones y consecuencias: las c&#xE9;lulas individuales est&#xE1;n bien acoplados entre s&#xED; dentro de los tubos de la CE. La inhibici&#xF3;n de GJCs con derivados del &#xE1;cido glicirret&#xED;nico coincide con la p&#xE9;rdida de hiperpolarizaci&#xF3;n mediada por IK (Ca) / SK (Ca), con independencia de Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, obviando el uso de estos agentes en la soluci&#xF3;n de los determinantes clave de la conducci&#xF3;n el&#xE9;ctrica a lo largo del endotelio.

La conducci&#xF3;n el&#xE9;ctrica a lo largo Tubos de c&#xE9;lulas endoteliales de las arterias de alimentaci&#xF3;n del rat&#xF3;n: Acciones de confusi&#xF3;n de derivados del &#xE1;cido glicirret&#xED;nico

To test the hypothesis that Ca(2+) responses to GPCR activation are coordinated between neighboring ECs of resistance arteries.

Coordination of intercellular Ca(2+) signaling in endothelial cell tubes of mouse resistance arteries.

Intercellular conduction of electrical signals underlies spreading vasodilation of resistance arteries. Small- and intermediate-conductance Ca(2+)-activated K(+) channels of endothelial cells serve a dual function by initiating hyperpolarization and modulating electrical conduction. We tested the hypothesis that regulation of electrical signaling by small- and intermediate-conductance Ca(2+)-activated K(+) channels is altered with advancing age.

Matthew J. Socha

Medical Pharmacology and Physiology

University of Missouri

Isolation of Microvascular Endothelial Tubes from Mouse Resistance Arteries